抗幽门螺杆菌抗生素左氧氟沙星经胃与胆汁转运、分布特点的研究.pdfVIP

第四届全国出门螺杆蓖感染及消化疾病诊治l同秉{舒鼠仑1之汇编 抗幽门螺杆菌抗生素左氧氟沙星经胃和胆汁 转运、分布特点的研究 鲍峻峻许建明胡咏梅 安徽医科大学第一附属医院消化内科合肥230022 背景 应用抗生素有效根除lip具有十分重要的临床意义。由于HP特异性定植于胃粘液及其下方黏膜 表面，因此，Hp根除成功与否理应取决于治疗部位局部抗生素的浓度。只有抗生素在其定植部位浓 度达到所需杀菌浓度方可起效。抗生素口服后由血转运至胃，这是抗生素胃内局部浓度升高的决定 性因素，是HP根除成功的关键问题。抗生素胃内转运具有特殊的药代动力学特点，存在胃内直接 分布及肠道吸收后由血转运至胃组织的跨膜转运。研究抗生素胃内转运、分布特点可为根除HP方 案中抗生素的选择提供试验数据。 近年来liP耐药情况日益严重，经典的三联疗法根除失败率逐年升高。临床研究发现，含左氧 氟沙星为基础的治疗方案是目前根除率较为理想的治疗方案。但针对左氧氟沙星胃内转运分布情况 的基础研究尚未见报道，缺乏左氧氟沙星胃内区域药动学资料。另外，胃内pH值可影响抗生素的 胃内转运、分布。因此，联用PPI是否影响左氧氟沙星胃内转运、分布尚不明确。由于解剖结构的 毗邻关系，胆总管直接开口于十二指肠，胆汁内抗生素也可随胆汁返流入胃，从而影响胃内局部抗 生素浓度。研究胆汁内左氧氟沙星的药动学过程，有助于阐明左氧氟沙星抗}Ip作用。 目的 本课题拟在建立研究抗生素胃内和胆汁转运、分布的动物模型基础上，初步探讨左氧氟沙星在 大鼠胃内和胆汁转运、分布特点；观察联合应用雷贝拉唑对上述胃内过程的影响；同时，结合动物 实验研究结果，初步探讨左氧氟沙星在人体胃内、胆汁内浓度情况，从而为临床应用左氧氟沙星根 除HP过程中的临床药理学优势提供实验依据。 方法 (1)建立抗生素胃内转运、分布的动物模型：Wistar大鼠术前禁食，麻醉开腹行胆总管置管。 在十二指肠距幽门2cm处，经切口橡胶软管通过幽门插入胃内冲洗，以备胃液收集。试验结束时， 采用水泡法剥离胃黏膜，拭干、称重后研磨匀浆，用于测定药物浓度；胃粘液层厚度采用冰冻切片 PAS，AB染色法进行测量。 (2)建立不同生物样本中左氧氟沙星检测的HPLC方法：大鼠和人血清、胃液、胃黏膜和胆汁 样本采用三氯乙酸或甲醇沉淀蛋白，取上清液测定左氧氟沙星浓度。HPLC条件：流动相乙腈 一50mmoFl柠檬酸一lmol／l醋酸铵(19-80：1；v／v)，Kromosil C18分析柱，柱温500，流速lml／min， 检测波长295nm。评价选择性、线性、准确度、精密度、稳定性和灵敏度； 静脉给药后2小时内按15rain间隔取血处死动物，收集不同时点胃液、胃黏膜样本，检测左氧氟沙 星浓度，了解大鼠左氧氟沙星胃内转运、分布特点； ·8l· 第四届全国幽门螺杆菌感染及消化疾病诊治临床论坛论文汇编 100mg／kg组共3个剂量组。术中行颈动脉置管术及胆总管置管术，分别在静脉给药后12小时按1小 时间隔，收集不同时点血液及胆汁样本，检测左氧氟沙星浓度，了解大鼠左氧氟沙星胆汁分布特点： bid+左氧氟 (5)人体左氧氟沙星胃内分布研究：4例HP感染患者，采用口服雷贝拉唑10mg 沙星500mgqd+阿莫西林1．0bid方案治疗，第lO天行胃镜检查，留取胃粘液标本后，自下而上分 别留取胃窦、胃体、胃底各部位胃黏膜样本，检测左氧氟沙星浓度，了解人体左氧氟沙星胃内分布 特点； (6)人体左氧氟沙星胆汁分布研究：17例因胆系疾病行胆道探查术后留置T管的患者，分别 间点留取血标本，按1小时间隔留取胆汁样本，检测左氧氟沙星浓度，了解人体左氧氟沙星胆汁分 布特点。 结果 (1)对研究抗生素胃内和胆汁转运、分布的动物模型中所涉及的胃液收集方法、胃黏膜剥离方 法以及胃粘液层测量方法等关键实验方法和不同生物样本中左氧氟沙星HPLC检测方法进行验证， 证明动物模型和HPLC检测方法具有