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丙型肝炎病毒F蛋白抗原性及患者血清F抗体流行率的研究
邵圣文戚中田+
(第二军医大学微生物学教研室,军队医学傲生物学重点实验室.上海.7.00433)
【摘要】目的探讨HCVF蛋白的抗原性及患者血清F抗体的流行率。方法利用11条引
物延伸获得HCVf基因,以此为模板经PCR扩增得到截短型f65基因片段,定向克隆至
F65蛋白。以
pET32a(+),重组子转化大肠杆菌Plyss菌株,IPTG诱导后用Ni离子树脂纯化HCV
F65蛋白为抗原,ELISA法检测Hcv感染者血清中F抗体。应用F65蛋白免疫新西兰家兔制备多
f基因,构
克隆F抗体,再用SPA树脂纯化兔血清中F抗体。结果合成了长度为414bp的HCV
的HCV
165蛋白。以HCVF65蛋白为抗原,ELISA法检测患者血清中F抗体,显示:30份HCV
F65
30000。Westernbloti正实,HCVF65蛋白能与兔源性F抗体发生特异性反应。结论HCV
蛋白具有抗原性,可用来检测血清中F抗体。HCV感染者血清中存在F抗体。兔源性F抗体可用
来检测HcV瞪白。
【关键词】肝炎病毒,丙型;瞪白;抗原性;F抗体流行率
in
of CVirusFProteinandSerumPrevalenceofanti-F
AntigenicityHepatitis
HCV.infectedPatients
SHAO
Sheng-wen,QtZhong·dan
forMedkal Medical
Laboratory Military
DepartmentofMicrobiofogy.PLAkey Microbiology,Second
University,Shanghai,200433.China
To the of
examine C
【Abstract】Objectivesantigenicityhepatitisvirus(HCV)Fprotein
and serum ofanti-FinHCV二infected口atietitS.MethodsEleyenof
investigateprevalence pairs
wasusedto the HCVf whichthetruncated
overlappingprimers synthesizefull.1ength gene.from
into
HCVf65 was PCR.HCVf65 wasthencloned
genefragmentamplifiedby gene pET32a(+),and
llansformedintoE.colistrain recombinantE.coliwereinduced for
Plyss(DE3).n圮above
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