丙型肝炎病毒F蛋白抗原性及其患者血清F抗体流行率研究.pdfVIP

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丙型肝炎病毒F蛋白抗原性及患者血清F抗体流行率的研究 邵圣文戚中田+ (第二军医大学微生物学教研室,军队医学傲生物学重点实验室.上海.7.00433) 【摘要】目的探讨HCVF蛋白的抗原性及患者血清F抗体的流行率。方法利用11条引 物延伸获得HCVf基因,以此为模板经PCR扩增得到截短型f65基因片段,定向克隆至 F65蛋白。以 pET32a(+),重组子转化大肠杆菌Plyss菌株,IPTG诱导后用Ni离子树脂纯化HCV F65蛋白为抗原,ELISA法检测Hcv感染者血清中F抗体。应用F65蛋白免疫新西兰家兔制备多 f基因,构 克隆F抗体,再用SPA树脂纯化兔血清中F抗体。结果合成了长度为414bp的HCV 的HCV 165蛋白。以HCVF65蛋白为抗原,ELISA法检测患者血清中F抗体,显示:30份HCV F65 30000。Westernbloti正实,HCVF65蛋白能与兔源性F抗体发生特异性反应。结论HCV 蛋白具有抗原性,可用来检测血清中F抗体。HCV感染者血清中存在F抗体。兔源性F抗体可用 来检测HcV瞪白。 【关键词】肝炎病毒,丙型;瞪白;抗原性;F抗体流行率 in of CVirusFProteinandSerumPrevalenceofanti-F AntigenicityHepatitis HCV.infectedPatients SHAO Sheng-wen,QtZhong·dan forMedkal Medical Laboratory Military DepartmentofMicrobiofogy.PLAkey Microbiology,Second University,Shanghai,200433.China To the of examine C 【Abstract】Objectivesantigenicityhepatitisvirus(HCV)Fprotein and serum ofanti-FinHCV二infected口atietitS.MethodsEleyenof investigateprevalence pairs wasusedto the HCVf whichthetruncated overlappingprimers synthesizefull.1ength gene.from into HCVf65 was PCR.HCVf65 wasthencloned genefragmentamplifiedby gene pET32a(+),and llansformedintoE.colistrain recombinantE.coliwereinduced for Plyss(DE3).n圮above

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