8种烈性中药的体外急性毒性试验初探.pdfVIP

Effectofhsa-miR··2 onmovementandinvasionof 1-·3p Esophageal Carcinomacell sHI Hui，LIURan+ Ya-juan，LIU ofEnvironmentalMedicine KeyLaboratory ofPublic Engineering,MinistryofEducation，SchoolHealth, Southeast 21 University,NanjingJiangsu 0009，China Inorderto the roleofhsa··miR·-2in Abstract：Objective explorepotential 1·-3p esophageal carcinomacelllineEca9706．Methods real-timePCRWaSusedtoevaluatethe Quantitative levelofmiR-2inhsa-miR．2mimicstransfectedEca9706cellsandcontr01． expression 1—3p 1．3p TranswellandWound werecarriedouttodeterminecellinvaSionand healing experiment ofEca9706cellstransfectedwith migrationability hsa-miR．2mimics．Results 1．3p hsa-miR-2 1evelin 1-3pexpressiontransfectedEca9706was elevated with evidently compared contr01．Cell showedthat hsa-miR·2 inEca9706 negative experiments enhancing 1—3pexpression increasedthe of carcinoma significantly cellinvasionand capacityesophageal migration． Conclusion ofhsa-miR--2 serveasan and inthe Up-regulation 1·-3pmight oncogeneparticipate of a for of cancer,which developmentesophageal suggestspotentialapplicationearlydiagnosis cancer． esophageal carcinoma Keywords：esophagealcell；hsa-miR·-21··3p；invaSion；migration 8种烈性中药的体外急性毒性试验初探 陈素珍，李瑾翡，曾秋敏 广东省食品药品检验所，510180 摘要：目的比较两种体外细胞毒性方法，探讨其用于预测中药急性毒性的可能性。方法应 用3T3细胞中性红摄取实验、MTT实验检测8种烈性中药的细胞毒性，将测得的Ic50值分别 与急性经口毒性试验的小鼠LD50值进行比较。结果3T3细胞MTT、中性红2种检测方法中， 以MTT法的检测结果与体内LD50的关联性较好。结论与3T3细胞中性红法相比，M兀’i去可 较好地预测烈性中药的急性毒性，有望用于中药急性毒性的初筛实验。 急性毒性试验是毒理学安全性评价的首个基础性工作，传统的急性毒性试验由于实验 周期长、使用实验动物多，耗费人力物力大，越来越不能适应当前现状。且随着动物伦理 和“3R”原则的贯彻实施，体外替代实验成为当今研究工作的热点。已有研究表明，化学物 质的体外细胞毒性实验与整体动物实验结果有很大的相关性，有望用于化学物质急性毒性 筛型11。本研究旨在探讨体外细胞毒性方法用于预测中药急性毒性的可能性。 1．材料与方法 1．1试剂与仪器 8种烈性中药受试物：附子、炮附片、牵牛子、山豆根、雷公藤、制草乌、姜半夏、苦 楝皮中药配方颗粒均为由某有限公司提供。 RPMI 1640培养基 GIBCO公司 ；胎牛血清 杭州四季青 ：MTT 广州 威佳 ；中性红染料 广州威佳 ； M2E多功能酶标仪；OLYMPUS正置显微镜； 1．2溶液配制 进行动物实验时，将受试物用打粉机打碎至细粉，加温纯化水不断研磨至完 全溶解；进行细胞实验时，用PBS溶解受试物，经0．22um滤膜滤过后备用。 1．3实验动物 287 体重为189～229的NIH小白鼠，雌雄各半，共220只，由广东省医学实验动物中心 实 用许可证号：SYXK 粤 2009．0050。 动物购进后先在实验动物房饲养2天，动物饲养