微流控电学细胞的分析芯片.pdfVIP

2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析学术会议 微流控电学细胞分析芯片 勾洪磊，徐静娟，陈洪渊* 南京大学 化学化工学院 生命分析化学教育部重点实验室 南京210093 Email: hychen@nju.edu.cn;Tel/Fax: 025 细胞性质研究一直是医学及生化领域的热点问题，流式细胞术作为一项能够进行细胞快 速鉴别及高通量计数和区分的技术是细胞研究及医学检测的有效手段。但目前商品化的流式 细胞仪往往是激光辅助的，涉及仪器价格昂贵，操作复杂，而且需对样品进行荧光标记处理。 随着微流控芯片技术的快速发展，利用细胞固有的介电性质，基于芯片的流式细胞阻抗检测 [1] 正逐渐发展成为一项新的无损伤免标记的流式细胞技术 。然而目前大多数只是用于简单的 细胞计数和区分，而无法提供更多细胞信息。本文构建了一种新式芯片并提出流式细胞的阻 抗及电容同步分析用于细胞计数，种类鉴别及状态区分。 [2] [3] 芯片为双层构造，内部集成检测电极。利用化学镀金 及压印转移技术 在PDMS底片 流动通道两侧构造出对立的检测电极，再于其上对准粘合含封盖管道的PDMS盖片。对立电 极两端引出接至测量系统，并施加小振幅AC信号对流过此区域的细胞进行阻抗和电容的同 步测量。对于活细胞，电容和阻抗信号的峰数目对应于细胞数，峰强度因不同类别具有不同 大小而显示差别，可以此进行计数和类别区分。正常细胞的阻抗及电容信号均很明显，而凋 亡细胞只有相对较弱的阻抗峰。死亡细胞不显示任何信号。基于此结果，可进行细胞三种不 同状态的实时区分。 在低频交流电场中，细胞膜可视为绝缘，同时由于电极化，当细胞通过测量区域， 电极间阻抗及电容改变表现以信号脉冲，对应于不同的细胞体积与膜性质。细胞凋亡过 程中，细胞膜及细胞质将发生相应变化（如膜上磷脂层的重新分布，凋亡小体产生，细 胞质固缩，DNA片段化等），由此导致膜电容及胞质阻抗的降低。但胞膜仍然保持完整， 对电流依然能形成阻碍，因此其阻抗信号有所下降而电容信号消失。而对于坏死细胞， 由于细胞膜通透，电容及阻抗信号均消失。利用这种装置和方法，不仅可进行计数和类 别区分，还可方便地提供细胞的状态信息，作为一种无损免标记的测量方法，我们相信 其在医学诊断及生化研究领域必将具有广泛的应用。 参考文献 1. “Single-cell microfluidic impedance cytometry: a review”, T. Sun, H. Morgan, Microfluid Nanofluid, 8, 42 (2010). 2. “Patterned Au/Poly(dimethylsiloxane) Substrate Fabricated by Chemical Plating Coupled with Electrochemical Etching for Cell Patterning”, H. J. Bai, M. L. Shao, H. L. Gou, J. J. Xu, H. Y. Chen, Langmuir,25, 10402 (2009). 3. “Air PlasmaAssisting Microcontact Deprinting and Printing for Gold Thin Film and PDMS Patterns”, H. L. Gou,J.J.Xu,X. H. Xia, H.Y.Chen,ACSApplied Materials Interfaces, 2, 1324 (2010).