磷酸化与去磷酸化检测新方法的研究.docVIP

电化学论文：磷酸化与去磷酸化检测新方法的研究 【中文摘要】磷酸化和去磷酸化反应是生命过程中十分重要的反应,参与生物体内许多生命活动。这两个反应与细胞内的信号级联放大系统也密切相关。细胞可以针对外界各种物理信号或者化学信号,在体内引发一系列指数级的催化磷酸化反应,进而促使核内特定基因的表达,成功完成对外界信号的应激性。当这种应激完成之后,再经过去磷酸化作用,可以去除蛋白质的活性,从而使细胞恢复到正常状态。催化这两种反应的酶主要是蛋白质激酶和磷酸酶。这两类酶的异常调控会严重影响生物的生命活动,引发许多疾病。在本论文中,我们利用电化学技术设计了两种巧妙的电化学传感体系,用于检测这两类酶催化的磷酸化与去磷酸化反应。与一些传统的检测方法相比,本论文中构建的电化学方法具有灵敏度高、选择性好、成本低及操作简便等优点,在一些疾病的医疗诊断上有一定的应用前景。1.基于滚环扩增检测蛋白质激酶催化磷酸化的电化学方法我们提出了一种基于滚环扩增的电化学方法,用来检测蛋白质激酶催化的磷酸化反应。首先,底物多肽通过其C端半胱氨酸的巯基固定在金电极表面,同时,蛋白质激酶A能够将底物多肽中的丝氨酸催化磷酸化。然后,Zr4+通过静电结合作用将该磷酸化位点与DNA引物上的磷酸基团相连,再... 【英文摘要】Phosphorylation and dephosphorylation is the key to the cascade signal amplification system in cells. A series of exponential phosphorylation may be induced to answer the physical or chemical signals outside cells, which can further cause the expression of some specific genes. Accordingly, some functional proteins are thus activated. Later, the phosphorylated proteins are dephosphorylated so that the cells can return to normal state. Protein kinase and phosphatase are the main enzymes which catalyze phospho... 【关键词】电化学 蛋白质激酶 碱性磷酸酶 λ核酸外切酶 磷酸化 去磷酸化 滚环扩增 DNA探针 【英文关键词】electrochemistry protein kinase alkaline phosphatase λexonuclease phosphorylation dephosphorylation rolling circle amplification DNA probes 【索购全文】联系Q1：138113721 Q2：139938848 同时提供论文写作一对一辅导和论文发表服务.保过包发 【目录】磷酸化与去磷酸化检测新方法的研究 中文摘要 6-8 英文摘要 8-9 绪论 11-30 1 电化学方法简介 11-18 1.1 电化学系统 11-13 1.2 交流阻抗法 13-14 1.3 循环伏安法 14-16 1.4 计时电量法 16-18 2 电化学生物传感器简介 18-20 2.1 生物传感器 18 2.2 化学修饰电极 18-19 2.3 电化学生物传感器 19-20 3 磷酸化与去磷酸化相关研究简介 20-21 4 滚环扩增技术的原理和应用 21-24 5 参考文献 24-30 第一章 基于滚环扩增检测蛋白质激酶催化磷酸化的电化学方法 30-44 1.1 引言 30-31 1.2 实验部分 31-35 1.2.1 实验仪器 31 1.2.2 实验试剂 31-32 1.2.3 多肽自组装单分子层在金电极表面的固定 32-33 1.2.4 蛋白质激酶A催化磷酸化反应 33-34 1.2.5 Zr~(4+)介导的引物DNA与磷酸化多肽的连接 34 1.2.6 金电极表面的滚环扩增反应 34 1.2.7 电化学实验 34-35 1.3 实验结果与讨论 35-41 1.3.1 传感器的原理 35-36 1.3.2 实验各阶段金电极表面的电化学响应 36-38 1.3.3 蛋白质激酶催化磷酸化的定量检测 38-40 1.3.4 蛋白质激酶A抑制剂的研究 40-41 1.4 结论 41-42 1.5 参考文献 42-44 第二章 碱性磷酸酶催化去磷酸化反应的电化学检测技术 44-60 2.1 引言 44-45 2.2 实验