6基因的表达.ppt

第六章 基因的表达 重点：转录和翻译过程的概念及基本过程。 难点：真核生物转录和翻译过程的起始与酶类作用特点。 基本要求： 掌握DNA转录与翻译的概念及基本过程。 比较原核和真核生物转录和翻译的异同点。 基因表达的概念 基因表达是指生物基因组中结构基因携带的遗传信息通过转录、翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质，进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 对于rRNA、tRNA编码基因来说，基因表达就是转录生成RNA的过程。 转录和翻译 生物体以DNA为模板合成RNA的过程称为转录，即将DNA的碱基序列转抄成RNA的碱基序列。 转录还包括tRNA和rRNA的生物合成，这两种RNA虽不能作为蛋白质生物合成的模板，但在蛋白质生物合成中起着极其重要的作用。 翻译是将RNA分子上的核苷酸序列信息转变为蛋白质分子中的氨基酸序列。 遗传信息储存在DNA分子上，转录生成mRNA；mRNA是指导翻译的直接模板；蛋白质是基因表达的最终产物。 第一节 原核生物基因的转录和翻译是偶联进行的基因表达过程 原核生物没有细胞核，基因转录和翻译发生在同一空间，而且在时间上也没有严格的分开，在转录过程完成前，RNA就已经被核糖体结合、作为模板用于翻译，这是原核基因表达与真核基因表达的一个重要差别。 与真核基因相比，原核基因的表达相对较简单，对其转录和翻译过程了解较清楚。 一、RNA聚合酶全酶结合启动子并起始转录 不对称转录（asymmetric transcription）：在DNA的双链分子上，只有一股链可转录，另一股链不转录。 RNA聚合酶全酶结合启动子而形成闭合复合物 闭合复合物转变成开放复合物 RNA聚合酶催化约10个核苷酸聚合 RNA聚合酶的核心酶离开启动子区 原核生物的转录起始 二、RNA聚合酶的核心酶在RNA链延伸过程中催化RNA合成 （NMP）n ＋NTP———→（NMP）n + 1 ＋PPi 三、ρ因子依赖性和非依赖性两种机制介导转录的终止 依赖ρ因子的转录终止 四、原核生物的tRNA和rRNA需要进行转录后加工 从操纵子转录出来的是一个完整的RNA分子，称为初级转录产物（primary transcripts)。 原核生物的mRNA一般不需加工即可作为模板；tRNA和rRNA须经修饰和加工成为具有生物功能的成熟分子。 tRNA前体的加工：包括剪切作用、添加或修复3’端CCA序列和碱基的化学修饰 rRNA前体的加工：如rrnD操纵子转录的产物为30S RNA，经RNaseP剪切、内切及外切酶切除间隔序列，得到成熟的16S、23S、5SrRNA。 五、翻译是核糖体与mRNA结合及定位的过程 蛋白质生物合成需要的蛋白质因子 蛋白质生物合成的过程需要众多的蛋白质因子的参与 起始时需要起始因子（IF） 延长时需要延长因子（EF） 终止阶段需要释放因子（RF）和核糖体释放因子（RRF） 九、原核生物基因转录与翻译具有原核生物自身的特点 mRNA的转录、翻译和降解偶联进行； mRNA所携带的信息量差别很大； 大部分是多顺反子mRNA，也有少数单顺反子mRNA 某些密码子是原核生物优先利用的密码子。 细菌中约有30~40种tRNA 第二节 真核生物基因的表达 真核细胞有细胞核，转录和翻译发生在不同的空间，基因表达过程更复杂； 真核染色体DNA与组蛋白形成核小体； 真核基因与原核基因在基因结构和mRNA结构上也存在差异； 真核基因表达与原核基因表达在很多环节上有不同之处。 二、真核生物RNA的生物合成 真核生物的RNA聚合酶：有3型，即Ⅰ、 Ⅱ、Ⅲ，识别启动子Ⅰ、 Ⅱ、Ⅲ 。 转录因子有通用转录因子和基因特异性转录因子两大类。 通用转录因子将RNA聚合酶与启动子结合在一起，形成前转录起始复合物（preinitiation complex）。 PIC的形成过程 在开链之前，必须靠TFⅡ之间的相互作用与结合，才能使RNA聚合酶加入此复合物中，形成起始前复合物（pre-initiation complex, PIC）。 四、初级转录产物经过加工后转变为成熟RNA (一)mRNA前体的转录后加工 ①加帽、加尾的修饰 ②mRNA的剪接 六、真核生物与原核生物的翻译起始阶段差异很大 真核生物的翻译过程与原核生物的翻译过程有很多相似之处。 差异主要在翻译的起始阶段。 翻译起始因子以eIF表示，至少有9种。 蛋白质合成后，绝大多数还需进行加工与修饰。 真核生物的翻译起始 肽链合成的终止：真核生物只有一种释放因子（RF） 八、肽链在翻译结束后需要进行加工 多数蛋白质肽链合成后，需要经过一定的加工或修饰，才能成为具有一定构象和功能的蛋白质；加工包括：肽链折叠、二硫键生成、亚基聚合、肽段水解切除及某些氨基酸残基侧链基团的化学修饰等。 1