扫描电化学显微镜监测单个细胞释放前后形貌.pdf

2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 扫描电化学显微镜监测单个细胞释放前后形貌 王 玮，熊跃，吴文展，黄卫华，王宗礼，程介克+ (武汉大学化学与分子科学学院，武汉430072) electrochemical 自上个世纪80年代Bard小组提出扫描电化学显微镜(scanningmicroscopy, 着特有的优势：(1)对细胞的形态及活性无影响，可以实现细胞活体测定：(2)伏安型探针只对 电活性物质有响应，选择性好(3)空间分辨和检测灵敏度高；(4)多种工作模式可以实现不同 目的研究。如研究细胞性质，一般采用收集模式，而研究细胞形貌一般采用反馈模式。大多数已 报道的SECM细胞成像采用等高模式，因为等高模式所需的仪器设备相对简单：在商品化的 CHl900 SECM上即可实现，无需其它辅助元件。定量分析具有坚实的理论依据。此模式的工作 原理是探头在基底表面进行等高的x．Y方向扫描，同时记录探头在不同位置的电流大小。探头电 流的大小反应出基底在Z方向的高低不等，从而可得到基底的三维图像。当探针尺寸、形状一定 时，SECM图像的分辨率主要取决于探针材料、表面状态、电介质选择以及SECM的扫描参数 的优化。 人脐带静脉血管内皮细胞0-1UVEC)为衬附于人体血管内腔面的单层扁平细胞，它作为半透 膜，将血管壁和管腔分开，调节血管内、外的物质交换，并起到屏障作用。血管内皮细胞功能失 调会导致血管活性物质平衡紊乱，造成血管弹性张力改变等。在高血压等许多心血管疾病的发生 直径5．5岬)作为探针，根据探针结构和尺寸建立了一套优化的SECM扫描参数。采用扫描电 对单个细胞释放前的形貌进行了电化学成像，而且对细胞受激释放后的三维形态变化进行了监 约为16．8 直观地、形象地、定量地比较了释放前后细胞三维形态的变化。为进一步研究和理解细胞形态和 细胞生命活动间的关系奠定了基础。检测到的最小变化为O．5ixm，充分显示了SECM进行高时 成像分辨率。并结合火焰熔融法【10l和自制碳纤维微盘电极的包封方法，研制出低噪音、电化学 活性稳定的碳纤维纳米盘电极(CnIDE)，半径仅为61nm，为今后进一步提高SECM恒距离模 式细胞成像分辨率创造了可能。 ‘通讯联系人 187 2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 图2单个内皮细胞释放前后的SECM扫描形貌 (A)单个内皮细胞受激释放前的SECM扫描形貌，(B)单个内皮细胞受激释放后的SECM扫描形貌 参考文献： A FR 【1】BardJ，Fan F，KwakJ，eta1．Anal．Chem．，1989，61：132． J，BardA．J．Anal，Chem．，1989，61：1221． [2】Kwak I A，BlOchlA，DietzelD，et 【3】Hengstenberg J H J M，MillerM，BaurE，et [4]Liebetrau a1．Anal．Chem．，2003，75：563． S M A，MirkinV，et [5]FengW，Rotenberg a1．Anal．Chem．，2003，75，4148． LP，SchuhmarmW，Schulte 【6】Bauermann A．Phys．Chem．Chem．Phys．，2004，6：4003． R S [7】KurulugamaT，WipfD0，Takacs S，et 11I A，Pong