我国朊病毒和朊病毒病的研究现状.pdf

垒蔓苎璺堡銎塞堕塑翌塞堑堕墨至塑 ——一 我国朊病毒及朊病毒病的研究现状 刘雨田王志亮 (农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中。青岛南京路369号266032) 而其他朊病毒病如TME(水貂传染性脑病)和CWD(糜鹿慢性消耗性疾病)的研究还未见报道。 一、CJD的研究 早在1994年，林世和等应用改进的免疫组织化学染色进行CJD诊断，发现脑切片呈突触型阳性，与 3 此同时，陈怀红等在临床病理方面进行了CJD的诊断研究与分析。1996年，有人又成功地将cD脑组 57B J 0 8，Ba l 织匀浆接种于C L／6 i s f a b／c和W r鼠脑内，并分别于生产第二、三代时 发病。这些研究是我国在朊病毒病诊断方面的最初报道。之后，随着世界各国对朊病毒和朊病毒病的重视 以及该领域的研究热潮，我国也从此开展了红红火火的相关研究。1997年，我国学者(邓倩等)通过CJD 患者的脑电波进行初步诊断，发现CJB病人的脑电图均有短间隔周期性放电，疾病在不同阶段有不同的特 J 壳核于T2加权像均里对称性均质高信号。头部磁共振成像的异常信号对C D诊断虽非完全特异，但结 合临床具有一定价值。在2000年，宋晓南等将CJD患者的脑脊液进行了I 4—3—3蛋白的检测，发现 进行性痴呆和肌阵挛为特征，脑电图呈典型的发作性周期性高波幅双相和三相波，组织学所见为海绵状变 年接受白内障手术的患者，因近来出现傻笑、语无伦次、乱扔脏物继而卧床不起，四肢僵硬并大小便失禁． 列合成多肽，与载体偶联后免疫动物，制备了抗血清，并证实可识别正常的PrP蛋白；通过克隆神经元信号 3 传导蛋白质14 3‘编码基因，以研究其在人神经退行性病变中的诊断价值、细胞信号传导过程中的作 用及对细胞分裂、细胞凋亡的影响(祖莹等，2001)；利用脑cDNA文库，经PCR获得了S100基因并克隆 至原核表达载体DGEX 抗原制各了抗体，抗体经纯化后，用生物素(B嘲s)标记，建立了可定量检测S100蛋白的生物素亲和素系 究14-3—3‘蛋白的表达(祖莹等，2002)。 二、Scrapie的研究 在羊痒病方面的研究开展的相对较晚些。2001年，李运敏等用大肠杼菌表达的牛朊病毒正常成熟蛋 法证明本抗体可以与牛海绵状脑病和羊瘙痒病脑匀浆中的正常PrP反应。孙宪锋等(2001)用羊瘙痒因子 神经病理学检测发现，海绵状空泡变性的检出率为59％，淀粉样斑的检出率为17．6％。利用免疫组化和 ——△曼苎璺堕墨堕堕塑堡塞堑堡墨至塑 以往报道的金黄地鼠适应株263K不同，139A毒株发病动物出现严重的瘙瘁，而无明显的共济失调。感染动 检测发现了蛋白酶抗性朊蛋白(张宝云等，2001)。在羊瘙痒病小鼠适应株ME7颅内接种金黄地鼠的实验 发现，接种后460～530d，感染动物出现明显的症状，主要为消瘦、嗜睡、运动迟缓，并且感染动物脑 病脑干组织悬浮液接种于2只新西兰边区莱斯特育成羊及2只新西兰边区莱斯特和美利奴杂交2代的育 成羊的脑内，观察293d后发现羊只出现痒病症状，实验室检测为痒病，因而说明痒病因子在甲醛处理后 仍具有致病性。对于中国小尾寒羊正常朊蛋白基因的研究，张海涛(2003)在硕士论文中有详细描述，他 从该基因的克隆、表达、鉴定、测序等方面进行了分析，。李运敏等(2002)认为中国小尾寒羊朊病毒蛋 物脑组织中即检测到PrPSc分子。比临床症状出现的时间早，且无糖基化形式的PrP分子所占百分比在接种 后期增加明显(高建梅等，2003)。 三、BSE的研究 N 我国疯牛病的研究最早是在2000年开始的。王大伟等(2000)利用DA熏组技术，将牛朊病毒正