禽腺病毒活载体疫苗的研究进展.pdf

大会报告与文献综述部分 禽腺病毒活载体疫苗研究进展7 刘新鑫．丁壮·。尹仁福，邦蜜蜜，捌羹 《吉林大学预防善压学田家重点学科动物重要病原与疫痛研究空． 吉琳长春130062) 擅要腺病毒是目前动物病毒中在形态和化学蛄构上研究得最为详细的病毒之一，其主要原因是腺病毒 泣有囊膜，衣壳蛄构清晰。易在电子显微镜下仔细现察，而且璩病毒的较酸和蛋白质易分离．在应用方面． 腺病毒是目前最为广泛使用的璃毒我律之一．以腺病毒为戴体构建重组疲苗，表选基因产物等，均是目前 善医学、医学．生物学研究的热门课题之一．臁病毒活栽体疫苗，象采用重组DNA技术，时一些腺病毒进 行陡电使其成为弱毒活苗，井可用其作为其它病毒免疫原基因的携带者．成为单价．双价或多价病毒活 疫苗． 关毽词禽腺藕毒：活戢体：麦苗 一、禽腺病毒的生物学特征 称，结构为脱氧核糖核酸(DNA)，对热和酸稳定。抗紫外线。对福尔马林和碘是敏感的， 不享有相同的群抗原，其中人腺病毒2型和鸡胚致死孤儿(CELO)病毒分别为两个属的代表 株。禽腺病毒可以早期在病禽的脾、肾以及腔上囊组织中分离到。根据其抗原性不同可分为 三个群：I群包括传统禽腺病毒及分离自鸡、火鸡、鹅和其它禽类的腺病毒，共有12个血清 型，它们享有一种共同的群抗原；Ⅱ群包括火鸡出血性肠炎病毒㈣、大理石脾病病毒 (MSDV)及鸡大脾病病毒，本群病毒含有一种与I群病毒不同的共同群抗原；Ⅲ群为减蛋综 合征病毒及来自鸭的相似病毒川，本群腺病毒部分地吉有I群病毒的共同抗原。 在临床上常用cEL0病毒作活疫苗载体，因此，在这主要介绍CELO病毒的生物学特征： 腺病毒I型，归于腺病毒A群。1954年Y鲫络等首次报告从鸡胚中分离到一种新病毒。并于1957 年命名为鸡胚致死孤儿病毒，简称cELo病毒。由于cELO病毒具有禽腺病毒属内各种的主 要生物学特性及抗原特性，1982年国际病毒学分类委员会OCTⅥ第四次报告把cEL0病毒确 定为禽腺病毒属的代表种。CELO病毒主要结构蛋白有hex∞、pB@ntonb船e)、pⅥ、pVIII、 fiberl和nb盯2；删pretelminalp咖in)、Pol删A binding 二、腺病毒活载体疫苗研究历程 第一代的腺病毒载体主要是去除E1、E3区．插入外源基因的长度可达8kb。但在宿主细 胞内有低水平的病毒蛋白表达，病毒蛋白和外源目的蛋白引起CD4、CD8、T细胞依赖的细 胞免疫和体液免疫，表现为感染组织的炎症反应和外源基因表达的消失．而且免疫反应中产 生的肿瘤坏死因子一(IFN)、肿瘤坏死因子一aⅡNF—_日)抑制病毒载体中的启动子从而抑制外 源基因的表达。因此，在二次应用时，强烈的免疫反应使外源基因的表达迅速消失a而在人 群中大多数的人均已感染过腺病毒．这使腺病毒的应用受到了很大的限制。为了降低免疫反 应．延长外源基因在体内的表达时间及允许再次转移。人们从以下的几方面进行探索。改进 腺病毒载体，减少病毒蛋白的产生。为了降低载体的免疫原性．一种方法是尽量去除腺病毒 的基因。 第二代的腺病毒在El、E3缺失的基础上进一步去除了E4区．人们在E2区编码DNA结合 蛋白的基因上进行了温度敏感型突变．从而使在非允许温度下不表达晚期基因产物，降低了 炎症反应，使外源基因表达时间延长。通过建立El、E4区互补的细胞系，人们发展了E1、 E4缺失的腺病毒载体，较E2A缺陷的腺病毒在外源基因的表达和安全性方面都有提高．这种 载体已用于鸟氮酸氨甲酰基转移酶缺乏症的工期临床实验Ⅲ． 7作者倚舟：刘新鑫(198扣)，女．吉林省吉林市人。现吉林大学在读硬士．主要从事动物及人善共惠传染 病的免疫臆治研究．’通讯作者：DiIlg_曲u锄g@yalI∞．∞吐∞ 116 中国畜牧鲁医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 Adeno—vims 第三代腺病毒载体即所谓空壳载体(Gutless／GlItIedvccto培或HD—Ad． 和病毒杀伤肿瘤细胞的双重疗效，但对一些qE侵害”性的疾病如遗传病等，腺病毒载体对正 常细胞的杀伤、载体自身及病毒基因编码的蛋自质所引起的免疫反应则成为副作用，也因此 使腺病毒载体的治疗效果有所欠缺。为了克服第一代腺病毒载体病毒基因泄漏表达和克隆容 量有限的缺点．Mit觚iK．小组将病毒基因组中Ll、L2、vAl+II和pTP等必需区域用