五味子治疗大鼠糖尿病肾病作用机制的血清代谢组学研究.pdfVIP

第 43卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究报告 第2期 2015年 2月 ChineseJournalofAnalyticalChemist~ 169 175 DOI：10．11895／j．issn．0253-3820．140564 五味子治疗大 鼠糖尿病肾病作用机制的血清代谢组学研究 皮子凤 门丽慧 张 静 周 园 宋凤瑞 刘志强 (中国科学院长春应用化学研究所 国家质谱中心(长春)吉林省中药化学与质谱重点实验室，长春 130022) (吉林大学药学院，长春 130021) 摘 要 采用基于超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪(Ulna—performanceliquidchromatography coupledwithquadrupoletime-of-flightmassspectrometry，UPLC／Q-TOF—MS)联用技术的代谢组学方法 ，通过分 析大鼠血清内源性代谢物的变化 ，研究五味子治疗糖尿病肾病的作用机制。利用高脂高糖饲料喂养并腹腔 注射链脲佐菌素 (STZ)建立糖尿病大鼠模型。给药 12周后 ，采用试剂盒方法测定尿蛋白、尿肌酐的含量 ，结 果表明五味子水提取物可以显著降低模型动物的尿蛋白含量 (p0．05)，对糖尿病大鼠肾病并发症具有一定 的改善作用。采用UPLC／Q-TOF-MS方法分析了五味子对糖尿病肾病大鼠的血清代谢轮廓 ，分析了健康组、 模型组和五味子给药组的大鼠血清，采用偏最小二乘法一判别分析 (Partialleastsquaresdiscriminantanalysis， PLS．DA)进行数据分析。PLS—DA得分图显示健康组、模型组和五味子组的代谢轮廓有显著差别，根据正交 偏最小二乘法一判别分析(Orthogonalpaaialleastsquaresdiscriminantanalysis，OPLS—DA)载荷图筛选，将对各 组分离贡献大的化合物的串联质谱分析数据 ，经HumanMetabolomeDatabase(HMDB)等数据库检索，进行质 谱信息匹配 ，鉴定出黄尿酸 、油酰胺、棕榈酰胺、尿酸、5一羟基己酸、硫酸对甲酚、对甲酚葡萄糖苷酸7种内源 性代谢物为生物标记物。研究结果表明五味子通过影响色氨酸代谢、嘌呤代谢、肠内菌代谢、脂肪酸代谢等通 路对糖尿病肾病发挥治疗作用，其中嘌呤代谢、肠内菌代谢通路可能是五味子发挥治疗作用的重要途径。 关键词 五味子；糖尿病’肾病 ；血清；代谢组学 1 引 言 北五味子为木兰科植物五味子(Schisandrachinens~(Turcz．)Bail1．)的干燥成熟果实，具有敛肺滋 肾、生津敛汗、涩精止泻、宁心安神等功效…。研究表明，五味子有效成分主要包括木脂素、多糖、挥发 油、有机酸、脂肪油、氨基酸、色素、鞣质等，药理作用涉及中枢神经系统、心血管系统、消化系统、生殖系 统 以及泌尿系统等各个方面。 研究表明，五味子油可以改善STZ联合高脂饮食诱导的Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛素抵抗，改善 细胞 的功能缺陷，提高胰岛素的分泌量，增加胰岛素和胰十二指肠同源盒因子基因的表达，从而发挥降血 糖作用 ]。五味子多糖可控制糖尿病小鼠体重减轻、多饮和血糖升高的症状 J，能显著促进肝糖原的 合成，抑制肝糖原分解而发挥降糖作用，且对糖尿病所引起的脂代谢异常也具有改善作用。五味子抗 炎、抗氧化、清除氧 自由基、增加周围组织对葡萄糖的摄取等药理活性在糖尿病肾病治疗中效果明 显 5]。五味子醇提液能显著改善C57BL／614小鼠的糖尿病肾病，阻抑肾小管上皮细胞．间充质转化及 纤溶酶原活化抑制因子一1表达是其作用机制 J。 目前，文献报道的五味子治疗糖尿病作用机制的研究，大多数是从药理作用以及分子角度进行 的。近年来 ，越来越多的研究采用代谢组学方法考察中药治疗糖尿病机制 J，但 尚无从五味子整体 作用角度对其治疗糖尿病肾病的作用机制进行研究的报道。本研究采用代谢组学方法，基于UPLC／ Q．TOF．MS技术，对五味子治疗前后糖尿病肾病大鼠血清中内源性代谢物进行了分析鉴定，从中药作 用的整体性角度，初步阐明了五味子治疗糖尿病肾病的作用