单管半套式RTPCR法检测贝类中轮状病毒的研究.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’() *! /( * # 年 月 $%% !#$ %’()(*(+$ ,-$ +,-. $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 单管半套式!#$%! 法检测贝类中轮状病毒的研究 ， 1 $ 1 1 1 寇晓霞 吴清平 张菊梅 范宏英 1 （广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室 广州 1%%9% ） $ （中国科学院武汉病毒研究所 武汉 !#%%91） 摘 要：轮状病毒（ ）是一种以贝类为载体的重要食源性病毒，目前来说， 是贝类中轮状病毒最有效 J(K5LH,C J28MNJ 的检测方法，但通常由于病毒含量较低以及贝类中存在大量的MNJ 抑制物，致使将其运用于实际样本的检测时灵 敏度仍较低。在实验室模拟自然环境，以人工播毒的方式使贝类富集轮状病毒，运用单管半套式J28MNJ 法进行检 测，并将单管半套式 与 、 的检测灵敏度做了比较，表明单管半套式 比 的灵敏度 J28MNJ :OPQR J28MNJ J28MNJ :OPQR 高 倍，是传统 的 倍，有时甚至 倍。另外，单管半套式 法降低了实验过程中的内源性和 1%%% J28MNJ 1% 1%% J28MNJ 外源性污染，使检测所需时间从S 缩短至! IS，大大改进和完善了食源性病毒检测方法。并同时以整只贝和仅以 贝的消化道为样检测表明，以消化道为样时的病毒检出率和检测灵敏度较高。 关键词：贝类，轮状病毒，半套式J28MNJ，食源性，检测 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） TE#E I! R %%%18$%E $%% %#8%!%18%! 轮状病毒（ ）是食源性病毒胃肠炎的主 大大降低了实验操作所带来的污染，而且可以缩短 J(K5LH,C 要病原之一。贝类作为滤过性摄食动物，很容易富 检测时间，降低检测成本，并为其它病毒的检测提供 集病毒，是病毒性和细菌性病原的重要载体。食用 借鉴。 含有病毒的贝类不仅对消费者的健康具有很大的威 材料和方法 胁，而且也会给水产业带来巨大的经济损失。因此， 建立有效的病毒检测法对保障食品安全具有重要意 ’ 材料 义。J28MNJ 是目前贝类中病毒检测最为行之有效 ’ ’ 病毒样本的收集和制备：从广州市儿童医院 的方法，但贝类中的病毒含量通常较低以及存在大 及南方医院新生儿科收集非细菌性腹泻病人的腹泻 量的 抑制物，因此，从贝类样品中对病毒进行