猪链球菌病双重PCR诊断方法的建立.pdfVIP

中国兽医科学 　2007 ,37 (08) :700704 Vet erinary Science in China 中图分类号 : S 852 . 6 11 :Q 503 　文献标识码 : A 　文章编号 : (2007) 猪链球菌病双重 PCR 诊断方法的建立 1 ,3 2 1 马清霞 ,何孔旺 ,陆承平 ( 1. 南京农业大学 动物医学院 ,江苏 南京 　2 10095 ;2 . 江苏省农业科学院 兽医研究所 农业部畜禽疫病诊 断重点开放实验室 ,江苏 南京 　2 100 14 ;3 . 青岛市畜牧兽医工作站 ,山东 青岛　26607 1) 　　摘要 : 根据猪链球菌 2 型荚膜多糖和马链球菌兽疫亚种类 M 蛋白的保守区序列分别设计了 2 对简并 引物 ,建立了一种能同时检测猪链球菌 2 型和马链球菌兽疫亚种的双重 PCR 方法 。结果显示 ,该双重 PCR 能从 100 个细菌的混合纯培养物中扩增出 2 条 目的片段 。而且可以直接从病料组织中检测到相应的病原 菌 。用建立的双重 PCR 方法和细菌分离培养法平行检测人工感染的组织病料 , PCR 方法与细菌培养法的 阳性检出率基本一致 ,但 PCR 方法的特异性好 、敏感性高 ,简便易行 ,可以用于猪链球菌病的流行病学调查 和实验室的快速鉴别诊断 。 关键词 : 猪链球菌 2 型 ;马链球菌兽疫亚种 ;双重 PCR Establ ishment of multiplex PCR assay f or the diagnosis of swine streptococcosis MA Qin gxia1 ,3 , H E Kon gwang2 ,L U Chengp ing1 ( 1. Col leg e of Vete ri na ry M e d ici ne , N anj i ng A g ricul t u ral Uni ve rs i ty , N anj i ng 2 10095 , Chi na; 2 . Key L aboratory of A ni m al Poul t ry D isease D i ag nos is of t he M i nis t ry of A g ricul t u re/ Vete ri na ry R esea rch I ns ti t ute , J i angs u A ca demy of A g ricul t u ral S ciences , N anj i ng 2 100 14 , Chi na; 3. Qi ng d ao S t ation of ) A ni m al H us ban d ry an d Vete ri na ry M e d ici ne , Qi ng d ao 26607 1 , Chi na 　　Abstract : To develop a multip lex PCR a ssay for t he rap id an d sen sitive det ectio n of S t rep tococcus s uis t yp e 2 and S t rep tococcus equi sub sp . z ooep i dem ic us in vi scu s f ro m pigs ,t wo p air s of degenerat e p rimer s were de signed and synt he sized accor din