中国鲎脑神经节5-羟色胺免疫组化的定位观察.pdfVIP

第 j4卷 第 1期 厦 门大学学报 (自然科学版) VOI54 NO．1 2015 ‘1月 JournalofXiamenUniversity(NaturalScience) Jan．2O15 中国鲎脑神经节 5一羟色胺免疫组化的定位观察 李林 明 ，黄辉洋 ，叶海辉 ，李少菁 (厦门大学海洋 与地 球学院 ，福建 厦 『]361102) 摘要 ：中 鲎(Tachypl“tridntatus)是一种具有特殊研究意义的海洋动物．本研究应用免疫组织化学方法对巾同诱 脑神绎节中5一羟色眩(5HT)的分布进行 了定位观察 ，发现 5-HT免疫 阳性主要分布在视神经层和 神经髓 的神 纤 维 ，中间体 以及簟形体周边 的细胞群 中，而蕈形体 巾未发现免疫 阳性．经 比较 ，中国鲎 j—HT的分布 美洲鲎 (J『imulu polypkemus)相似 ，而与昆虫、甲壳类存在一些 区别．本研究可为中国鲎的神经生物学提供基础资料． 关键词 ：中同鲎；脑神绛节；5羟色胺；免疫组化 中图分类号 ：Q426；S917．4 文献标志码 ：A 文章编号 ：0438—0479(2015)01—006,105 鲎科动物俗称 马蹄蟹，是一种被誉为 “活化石”的 生理学和中国鲎增养殖提供理论基础． 海洋底栖动物 ，其隶属于节肢动物 门、肢 口纲 、剑尾 目、鲎科．现存 的鲎科动物仅有 4种，即美洲鲎 (LiraU 1 材料与方法 luspoly#hⅢ “)、中国鲎 (Tachypleustridentatus)、 嘲尾 鲎 (Car(，Jr orpiusrotundicauda)和 南 方 鲎 1．1 实验试剂 (TactiypleusgiKas) ．鲎科动物在胚胎发育 、免疫机 5HT抗体购 自Sigma公司，DAB 色试剂盒和 制、神经生理等方面具有物种特殊性 ，其科研价值极 羊抗兔 SABC免疫细胞化学试 剂盒均购 自武汉博 }： 高．目前有关鲎科动物神经 内分泌 的研究主要集 中于 德生物丁程有限公司． 美洲鲎，这些T作 阐述 了 5羟色胺 (5-HT)、组织胺 、 1．2 切片制作 心兴奋肽等一些神经 内分泌因子在美洲鲎神经系统 巾的分布和功能 ． 成体中同鲎购买于厦 门市第八水产品市场，雄鲎 巾圈鲎是我围同家二级保护动物 ，目前资源破坏 壳宽为2l～25em，雌鲎壳宽为 25～3lCITI，迅速解剖 严重 ，峨需开展资源保护的T作．最近，本课题组对 中 出脑神经节于波恩氏液 4C同定过夜．组织块经梯度 闰鲎的神经解剖学和神经 内分泌开展了初步研究，已 酒精脱水 、二 甲苯透 明、透蜡 ，包埋后连续切片 ，切片 经发现脑神经节存在促性腺激素释放激素 (GnRH)类 厚度为 7pm． 似物 。．5一HT作为一种经典 的神经递质和神经调质 1．3 免疫组化程序 广泛地分布于脊椎动物和无脊椎动物 的神经系统 切片脱蜡至水 ；3 (体积分数)H ()：磷酸盐缓冲 l{j。。，与节肢动物 的昼夜节律 、调节摄食、防御反应 、 液 (PBS)溶液室温孵育 lomin，以消除内源性过氧化 牛殖调控等有关 …．本研究应用免疫组化方法观察 物酶的活性 ；滴加 正常 山羊血清 (1：l0)室温孵 育 10 _r5HT在 中 鲎脑神经节中的分布情况 ，并 比较其 min；滴加 5HT兔