Rht12矮秆小麦GA3ox基因的克隆与表达分析.pdfVIP

分子植物育种，2015年，第 13卷，第2期，第241—253页 MolecularPlantBreeding，2015，Vo1．13，No．2，241—253 研究论文 ResearchArticle Rhtl2矮秆小麦 GA3D基因的克隆与表达分析 刘颖 1阳文龙： 郭小丽 3翟晓3刘冬成 孙家柱 z夏石头 张爱民 1湖南农业大学植物激素与生长发育湖南省重点实验室，生物科学技术学院，长沙，410128；2中国科学院遗传与发育生物学研究所植物细胞与 染色体工程国家重点实验室，北京，100101；3中国农业大学生物学院，北京，100193 ‘通讯作者，xstone0505@163．com；amzhang13@163．com 摘 要 赤霉素3一氧化酶(GA3ox)是赤霉素生物合成途径中的一种关键酶，在茎的伸长中起着重要的作用。 为探讨GA3o戈基因和Rhtl2矮秆小麦矮化之间的关系，本研究利用同源克隆方法分离得到了小麦品种中国春 和宁98-2105f含矮秆基因Rht12)的GA3oxl和GA3ox2基因，并对其在茎的不同部位进行了表达模式分析。 研究结果表明，小麦 GA3ox．『和 GA3ox2均含有 3个外显子和 2个 内含子，其编码 的蛋 白具有2一酮戊二酸依 赖性的双加氧酶典型的保守结构域，但中国春和宁98-2105的GA3oxl和GA3ox2之间存在部分碱基的差异。 实时定量表达分析结果显示，GA3oxl和 GA3ox2在中国春和宁98—2105茎的不同部位的表达趋势基本一致， 但表达量具有较大差异，GA3oxl和GA3ox2在宁98-2105茎的倒一节结节中的转录水平显著高于中国春，推 测宁98—2105中赤霉素的信号转导通路可能受到了影响，即矮秆基因Rhtl2可能影响了赤霉素信号的传导。 本研究结果为进一步研究矮秆基因Rht12的致矮机理和利用提供了理论依据。 关键词 小麦，GA3ox，基因克隆，表达分析 CloningandExpressionAnalysisofGA3oxGenesfrom Rhtl2Dwarfing eat LiuYing YangWenlong GuoXiaoli ZhaiXiao LiuDongcheng SunJiazhu XiaShitou ZhangAimin2 1HunanProvincialKeyLaboratoryofPhytohormonesandGrOwchDevelopment，CollegeofBioscienceandBiotechnology，Hunna AgriculturalU— niversity，Changsha，410128；2TheStateKeyLaboratory ofPlantCellnadChromosomeEngineering，InstituteofGeneticsandDevelopmentalBi- ology，ChineseAcademyofSciences，Beijing，100101；3CollegeofBiologicalSciences，ChinaAgriculturalUniversity，Beijing，100193 ’Correspondingauthors，xstone0505@163．corn；amzhnagl3@163．com DOI：10．13271j／．mpb．013．000241 Abstract GA3-oxidase(GA3ox)isakeyenzymewhichcatalyzesendogenousbioactivegibberellinsformationand playscrucialrolesinstem elongation．TogaininsightintotherelationshipsbetweenGA3oxandRhtl2dwarfing wheat，weisolatedGA3oxIandGA3ox2fromwheatvarietiesChineseSpringandNing98—2105(containingRhtl2 gene)byhomologouscloning，andanalyzedtheirexpressionpattemsindifferentpartsofstems．Theresultsshowed thatthereweretwoin~onsandthreeexonsineachofGA3oxlandGA3ox2，thededucedaminoacidsequencesof GA3oxlandGA3ox2hadtypicalconservedd