云南省狂犬病病毒分子流行病学探究.pdfVIP

第八届全国微生物学青年学者学术研讨会 云南省狂犬病病毒分子流行病学研究 丁继超k2，张海林1，章域震1，杨卫红1，冯云1，李浩3，唐青3 000；2大理 1云南省地方病防治所／云南省病毒立克次体研究中心，大理671 学院公共卫生学院；3中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 5@163．COIn 通讯作者：张海林Email：zhangHL71 目的 掌握云南省狂犬病病毒流行株的基因型和分子遗传特征，分析狂犬 病流行病学特征和流行趋势，为狂犬病防治提供科学依据。 方法在云南省狂 犬病流行区采集狂犬病病人唾液、脑脊液和死者脑组织，在疫区采集病犬或疫 点扑杀犬的犬脑组织。脑组织用DFA法检测狂犬病病毒抗原，唾液、脑脊液和 抗原阳性脑组织用RT-PCR法检查狂犬病病毒核酸，核酸阳性标本进行N和M基 因核苷酸序列测定，用相关软件进行同源性和系统进化分析。 结果2007年一 2009年在云南省曲靖、昭通、保山、西双版纳、文山、红河、德宏州(市)共 采集标本619份，其中犬脑608份，死亡患者脑组织2份，病人唾液8份，病 人脑脊液1份。免疫荧光法筛查犬脑608份，阳性为11份；死亡患者脑组织2 份均为阳性；试剂盒提取唾液、脑脊液9份，阳性6份。对获得的19株云南狂 犬病病毒(1l份犬脑，2份人脑，5份唾液和l份脑脊液)的N和M基因进行 了RT—PCR扩增、克隆和测序。结果显示19株均含有完整的N和婀基因序列。 同源性分析表明，19株云南标本N和M基因核苷酸序列同源性范围分别为88．4 和82．5％-99．5％。19株狂犬病病毒流行株的N和M基因同源性和系统进化树 分析表明，均属于基因I型狂犬病病毒；核苷酸和氨基酸序列分析显示云南狂 犬病病毒基本按来源地区的不同显示出较高的亲缘特性；种系发生树分析提 示，云南狂犬病病毒与周边省份和邻近泰国等东南亚国家狂犬病病毒株具有高 度亲缘关系。 结论2007年--2009年云南省流行的狂犬病病毒株除来自周边 省份疫源地的病毒株外，极可能还有来自东南亚的病毒株，这些病毒株具有明 显的地域特征，这可能是造成云南省狂犬病疫情增长迅速的原因之一。云南省 存在狂犬病进一步流行和扩散的可能，今后仍需加强滇东北、滇南和边境地区 狂犬病防治工作。 123