西农萨能羊SREBP-1基因CDS区的克隆和序列分析.pdfVIP

·扬州· 第十六次全国动物遗传育种学术讨论会论文集 ·135· 西农萨能羊SREBP一1基因CDS区的 克隆与序列分析 许会芬，罗军’，赵旺生，石恒波 (西北农林科技大学动物科技学院， 陕西省农业分子生物学重点实验宣，陕西杨凌712100) 引育 Sterol Element RegulatoryBinding 子家族，它主要通过调控体内胆固醇、脂肪酸、甘油三酯和磷脂合成过程中一系列关键酶的表达，从而调节体内的脂 类平衡。目前确定的直接受SREBPs基因激活的基因已经超过30个，除了直接参与脂肪酸和胆固醇生物合成过程中 在克隆西农萨能羊SREBP-J基因的CDS区，为进一步研究该基因在山羊泌乳过程中的功能奠定基础。 材料与方法 Premier 采集泌乳盛期的西农萨能羊乳腺组织，Trizol法提取总ILNA，反转录成cDNA；利用Primer 5．0和Oligo 对测序得到的SREBP-I基因序列进行同源性分析；通过BioXM2．6软件对舳肋P-J的氨基酸序列进行物种间多序 列比对；利用ExPASy网站的ProtScale程序对OgF翻译后的氨基酸序列作疏水性分析。 结果 克隆得到西农萨能奶山羊SREBP-J基因的CDS区序列，其全长3441bp，编码1146个氨基酸，登陆GenBank序 SREBP—l不存在信号肽序列；蛋白质疏水性预测分析表明，SKEBP一1中间部位存在较强的疏水性。跨膜结构分析表 明SREBp一1属于膜结合蛋白，内部存在两个跨膜区域。 讨论与结论 本研究克隆了山羊艘朋P-J基因的CDS区序列，该基因在各物种间相似性较高。目前的研究表明，StLEBP-1 的跨膜结构与它的成熟和分化有很大关系。SREBP-I主要受营养水平和转录水平的调控．禁食动物再饲喂高碳水化 用主要是通过与该基因上的SRE元件结合而发挥作用的。并且该基因在脂肪酸代谢过程中处于中枢位置。故本实验 对山羊职眙P-J基因的CDS区进行了克隆，为研究该基因的调控机制奠定基础，同时也为本实验室研究脂肪酸代 谢基因相关网络提供基础。目前关于SI■EBP一1的研究主要集中在启动子与脂肪肝等代谢疾病上，在泌乳过程中对脂 基因在山羊泌乳过程中的脂肪酸代谢的调控机制莫定基础。 关键词：西农萨能羊；SRE8P-J基因；克隆 致谢：本研究受转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08009-162B)资助完成。 ·通讯作者。