减毒沙门氏菌介导的禽呼肠孤病毒σB和σC基因DNA疫苗的构建及其免疫特性研究.pdfVIP

家禽生产与禽病防治专题蟋》 6ll 而且价格低廉。0．5％黄芪口服液饮水能取得较好的经济效益，值得推广。灵芝的成本比较高，所以临 床应用上不建议使用。左旋咪唑对抗体产生影响不太理想，缺乏一致的结果，临床上应酎隋使用。综合 考虑，在养鸡业生产中建议使用免疫增效剂时首选鸡转移因子，其次为黄芪。 T040088 减毒沙门氏菌介导的禽呼肠孤病毒oB与oc基[]DNA疫苗 的构建及其免疫特性研究 万俊杰 文心田黄小波曹三杰’ (四川农业大学动物医学院，动物传染病与基因芯片实验室， 四川省动物疫病与人类健康重点实验室。四川雅安625014) 引言／目的 禽呼肠孤病毒(Avianmovinlses，舢W)能引起鸡以关节炎、腱鞘炎、吸收障碍为特征的免疫抑制 性疾病，常给养禽业带来巨大经济损失。oB蛋白是病毒外衣壳的主要组成部分，能引起细胞融合及诱 导宿主产生群特异性中和抗体。oC蛋白能够诱导机体产生特异性中和抗体及诱导宿主细胞凋亡【3】。本 OB基因和oC基因DNA疫苗的免疫原性特征，为研制安全有 研究目的是了解减毒沙门氏菌介导的ARV 效的ARv的DNA疫苗研究提供理论依据。 材料方法 分别扩增ARV的oB和oC基因，将o B基因插入真核表达载体pWⅨ上，构建了真核表达质粒pVAX． OB。将o B．oC。 C相连，构建了双顺反子真核表达质粒pVAXAB．O B基因与原有表达载体pVAXAB—o C质粒转入减毒沙门氏菌SL7207中，用重组沙门 再分别将构建好的2种真核表达质粒与原有p、，AxAB．0 氏菌对雏鸡进行免疫试验，并检测抗体水平。 结果 结果表明，所构建的疫苗对4．5日龄雏鸡有较高的安全性与稳定性。抗体检测结果显示，首免两周 后pVAX．O B． o C组抗体水平高于其它免疫 C与空质粒及PBS对照组相比，产生了较高水平的粘膜抗体IgA；pVAX．o B组。 组，且差异显著；双顺反子疫苗组的抗体水平始终高于pVAX．o 讨论 B．o 结果显示pVAX．oC组抗体水平高于混合免疫组pVAX—oB+p、，AX—a C组。 C组与pVAXAB．O C组可能是由于免疫剂量过大导致质粒提呈效率降低故而影响蛋白表 混合免疫组pⅥ气x．oB+pvAX．o B．oC组可能是由于两种基因对氨基酸利用率不同，导致两种蛋 达效率。双顺反子表达质粒pVAXAB．o B组。 白表达量不同，故而影响到最后的抗体产生水平，双顺反子疫苗免疫组抗体水平始终高于pwⅨ．O c)在诱导机体产生抗体水平方面要优于其它重组菌，但其免 结果表明重组沙门氏菌SL7207(pvAX．o