胃远端腺癌miRNA表达谱和miR-204调控机制的初步研究.pdfVIP

胃远端腺癌miRNA表达谱 及miR．204调控机制的初步研究 张文辉1王昌正1桂俊豪2常青1吴本俨1 1解放军总医院南楼消化科2解放军总医院生化科(100853) 目的 筛选胃远端腺癌中差异表达的miRNAs，观察其与临床病理因素的关系，并就其在胃癌 发生、发展中的作用及其机制进行初步的研究。 方法 1．取我科实验室液氮冻存的胃远端腺癌及配对正常组织进行HE染色，确认病理情况：采用 Agilent人miRNA寡核苷酸基因芯片，对3对胃远端(体、窦)腺癌组织及配对正常组织进行检测， 筛选胃远端腺癌差异表达的miRNAs。 2．选择特定miRNAs，在20例胃远端腺癌及配对正常组织中用实时荧光定量PCR进行验证， 并观察其与患者年龄、肿瘤大小、分期、淋巴结转移等临床病理因素的关系；在得到确认差异表达 的miRNAs后，同法观察其在17例贲门腺癌与胃远端腺癌之间表达是否存在差异、胃腺癌患者血清 中的表达状况、人胃粘膜细胞系与人胃癌细胞系的表达状况。 3．运用Targe．tScan等生物信息学方法，预测特定miRNA可能的靶基因。 结果 1．通过对液氮冻存胃远端腺癌及配对正常组织的HE染色，确认了各自的病理状况；miRNAs 芯片检测，发现共47条miRNAs在胃远端腺癌组织和配对正常组织中表达差异显著，上调的24条， 次报道于胃远端腺癌中； 111iR．375的表达情况与芯片一致，但其与患者年龄、癌栓有无、肿瘤直径、分化程度、分期、淋 巴结转移情况均没有关联；同时，miR．204水平在胃腺癌患者血清中显著升高，ROC曲线分析显 snRNA)；在责门腺癌和胃远端腺癌中，miR．375表达均下调，而胃远端腺癌下调的更明显，两 者有显著性差异。 3．生物信息学显示BCL广2，NR3c1，SOCS6等可能为miR一204的靶基因。 结论 1．胃远端腺癌有其独特的miRNA表达谱i 2．验证的差异表达miRNAs与胃远端腺癌临床病理情况无明显相关：责门腺癌与远端胃腺癌存 在miRNA的表达差异；血清miR．204可能作为胃腺癌潜在的分子标志物。 3．预测BCL-2，NR3C1和SOCS6等可能为miR一204的靶基因。 关键词微小RNA；胃远端腺癌：表达谱；验证；凋亡 ·45·