如皋鸡TLR4基因差异表达研析.pdfVIP

·扬州· 第十六次全国动物遗传育种学术讨论会论文集 ·493· 如皋鸡TLR4基因差异表达分析 刘艳，常国斌，胡国顺，李芹，陈国宏 (扬州大学动物科学与技术学院，江苏扬州225009) 引育 T0ll—like受体(Toll—like receptors，TLRs)在机体激活固有免疫和诱导适应性免疫的防御机制，特别是在先天性 固有免疫中起着重要作用，在人类和多种动物病原菌的PAMP(病原相关分子模式)识别中起着关键作用。在TLRs 庞大家族中，人们兴趣尤为集中在TLR4研究上。它是细菌脂多糖LPS识别的主要受体，并识别许多革兰氏阴性病 原菌、衣原体、螺旋体和病毒等病原微生物，其受体基因的遗传差异可造成机体对多种病原体抵抗力不一。目前国 PCR检测TLR4基因在鸡不同组织 内外关于鸡TLR4基因特别是其功能的报道相对较少，本研究运用Real—time 的表达，探讨化尺4基因在鸡不同组织不同生长发育阶段的时空表达规律和特点，为进一步深入研究化R4基因的 功能提供一定的理论依据。 材料与方法 本试验用鸡采自扬州翔龙禽业发展有限公司。选取2、4、6、8、10、12周龄的同一饲养条件的如皋鸡，公母各半 进行屠宰。屠宰取组织样，包括心、肝、脾、肺等16个组织，现场液氮保存；以fl-actin基因作为内参基因，根据已发 盒(DRR08IA)在ABI7500荧光定量PCR仪上进行试验。 结果 由先期预实验发现，化尺4基因在心、肝、脾、肺、肾、胸腺、法氏囊、喉头、气管、大脑、小脑、腿肌、胸肌、大肠、小 肠、腺胃各组织中均表达。其中在肺中的表达量最高，腺胃中的表达量最低。在根据相关文献及预实验结果。本试验 选取了与抗性相关的胸腺、脾、肺、法氏囊和气管五个组织。总体而言，撇4基因在2、4、6、8、12周龄时公鸡中各组 织的表达量略高于母鸡中，而10周龄时母鸡略高于公鸡。 讨论 死尺4基因往往与动物对疾病的抗性，易感性相关，本实验结果显示，TLR4基因在鸡的组织中广泛表达，其中在 肺中表达量最高，与2007年邱小田等在猪中的研究报道一致。本试验结果也显示，在不同发育阶段中除了10周龄 以外，TLR4基因在公鸡中各免疫器官中表达量高于母鸡中，这可能与公鸡自身的免疫力优于母鸡有关。 现有的研究表明．TLR4是细菌脂多糖(LPS)识别的主要受体，脂多糖是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分，可以 对多种器官造成炎症反应(包括肺部炎症)。TLR4基因又在肺中表达量最高，由此可见，革兰氏阴性菌均可以引起肺 部炎症；同时．脂多糖也是造成急性肺损伤(ALl)等肺部炎症疾病的主要因素，因此TLR4基因在肺部表达量最高， 在其他免疫器官中表达量也较高。当前，家禽传染性疾病是养禽业最大的威胁。给养殖业造成严重经济损失。鸡的 各个疾病的产生也均与个体的自身抵抗力有关。本试验进一步提示我们．TLR4在机体对肺部及各种疾病的一般抵 抗力上发挥了相当的作用，今后还需要对TLR4基因的功能进行深入研究，以期为鸡的抗病育种提供指导和依据。 关键词：鸡；TL尺4基因；差异表达