LPB-ELISA抗体评价口蹄疫疫苗效力方法与应用.pdfVIP

LPB-ELl SA抗体评价口蹄疫疫苗效力的方法及应用 王国平7一，王万雄2，吴润3 (1．中农威特生物科技股份有限公司，兰州730046 2．甘肃农业大学理学院，兰州7300703．甘肃农业大学动物医学院，兰州730070) stic模型和ROC曲线，分别确定预测保护率和抗体阈值，计算平均预测保护率和抗体阳性率，进而推断PD50， 结果的二项Logi 与金标准进行比较。【结果】当样本数n=l5时，平均预测保护率与抗体阳性率估计PD50，相对误差(Er)达到15％一40％；当 其Er均小于5l|‘，接近“黄金”标准。【结论】适当增加样本、应用平均预测保护率计算PDS0时，不但估计结果接近真实结 果，而且可用更短免疫期的抗体滴度对PD50的真实结果提前做出准确预测。本研究成果具有较强的理论价值和实践依据，使 口蹄疫疫苗效力试验的替代方法有了长足的进展。 关键词：口蹄疫；疫苗；PD50；替代方法 口蹄疫疫苗的效力采用本属动物免疫攻毒的方法进行量化[1]，对照动物发病和免疫失败往往引起生物 安全风险，动物实验昂贵、费力耗时而且难以标准化，以及人们对动物福利愈加关注[“]，导致进行动物攻 毒试验越来越困难，寻求口蹄疫疫苗效力试验的替代方法成为FMD疫苗研究的热点。目前建立的疫苗免疫 抗体滴度与攻毒结果的Binary 价值，但目前的研究存在一定的问题，包括诊断试验准确度的差异，试验样本的不足等等，直接影响疫苗 算的PD50进行比较，分析误差产生的原因与程度，为血清学方法评价口蹄疫疫苗效力的研究积累了理论与 实践依据。 1材料与方法 的PD50效力试验》。为分析实验样本数对PD50测定误差的影响，将2批疫苗的免疫抗体滴度和攻毒结果按 相同剂量组合并，记为第3批疫苗。 stic回归分析BinaryLogistic模型[viii]如下： 1．2二项Logi 1 4 l+exp[一(口+bt)】 t表示抗体滴度，P表示预测保护概率，a表示没有检测到抗体时动物产生免疫保护的几率的对数改变 口=一 量，b表示z改变一个单位时动物产生免疫保护的几率的对数改变量。 1．3ROC分析ROC曲线(receiveroperating 积(Areaundercurve，AUC)，以此评价诊断试验的价值。AUC介于0．5和1之间， AUC=O．5时完全无诊 表示Sen与Spe之间互相关系的一种方法，所得曲线可以确定最佳阈值，用于选择最佳阈值的方法很多， likelihood 一般选择约登指数(Youden，YI)或阳性似然比(positiveradio，LR+)最大的临界值作最佳 通讯作者：罗开健，副教授，E·mail：kjluo@scau．edu．cn ‘·-——665—— 第四届中国兽药大会——兽医微生物学、兽医生物制品学学术论坛论文集(2012年) 诊断阈值[”“]。 1．4疫苗PD50的估计 1．4．2抗体阈值法推断PDSO根据ROC分析获得的最佳抗体阈值，判定大于等于阈值者为抗体阳性、小于 者为抗体阴性，按Karber法与Reed—Muench法计算PD50。 PD50。 2结果与分析 状态的二项Logistic回归模型如下： 只-鲫=瓦丽丽与而(1) ％矿鬲丽獗丢而丽㈤ Statistics SPSS 19完成，所用方法为最大似然比法和迭代法[“]。回归结 分析过程由统计软件IBM 验显著平水(p0．05)：14dpv抗体滴度所建模型的参数未通过卡方检验显著平水(pO．05)。 表1二项Logistic曲线的参数估计