GM-CSF与生长抑素共表达基因疫苗的构建和鉴定.pdfVIP

江西农业大学学报 2014，36(5)：1132-1138 http：／／xuebao．jxau．edu．cn ActaAgricuhuraeUniversitatisJiangxiensis DOI：10．13836／j．jjau 魏金钢，韩晓萍，刘英俊，等．GM-CSF与生长抑素共表达基因疫苗的构建和鉴定[J]．江西农业大学学报，2014，36(5)：1132—1138． GM-CSF与生长抑素共表达基因疫苗 的构建和鉴定 魏金钢 ，韩晓萍 ，刘英俊 ，兰芳菲 ，梁爱心 ，吴红翔 ，舒邓群 (1．江西农业大学 动物科学技术学院，江西 南昌 330045；2．华中农业大学 动物科学技术学院，湖北 武汉 430070) 摘要：以基因疫苗pVGS／2SS-asd为模板，采用分子生物学方法，分别获得 目的片段粒细胞一巨噬细胞集落刺激 因子(GM-CSF)和含有乙肝表面抗原S基因的生长抑素基因(ss)。以共表达质粒plRES为载体，采用基因工 程方法 ，将GM-CSF和Ss基因片段分别克隆到载体的多克隆位点A和多克隆位点B上，构建共表达基因疫苗 plRES-GM-CSF／2SS，旨在同时表达GM-CSF和ss两种蛋白。获得表达质粒后，酶切和测序鉴定该共表达基 因疫苗 ，结果显示，该共表达基因疫苗pIRES-GM-CSF／2SS构建成功，为该共表达基因疫苗的后续研究奠定了 良好的基础。 关键词：粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF)；生长抑素 (SS)；共表达基因疫苗 中图分类号：Q781 文献标志码：A 文章编号 ：1000—2286(2014)05—1132—07 ConstructionandIdentificationofCo-。‘expressionGene VaccineofGM-CSFandSomatostatin (SS) WEIJin-gang，HANXla~,ping，LIUYing-jun，LANFang-fei， LIANG Ai-xin ，WU tto：：z-xiang ，SHU Deng-qun (1．CollegeofAnimalScienceandTechnology，JAU，Nanchang330045，China；2．CollegeofAnimalSci— enceandTechnology，HuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan430070，China) Abstract：WithgenevaccinepVGS／2SS—asdfortemplate，targetfragmentsofgranulocyte—macrophage colony—stimulatingfactors(GM—CSF)andsomatostatin(SS)genecontainedtheSgeneofHBsAgwereob— tainedbymolecularbiology．WithCO—expressionplasmidplRESofrvector，GM—CSFandSSgenefragments wereclonedtoMCSA(multiplecloningsiteA)andMCSB (multiplecloningsiteB)ofpIRESbygeneticengi— neenng．Co—expressiongenevaccineofGM—CSFandSS(pIRES—GM—CSF／2SS)wasconstructed．Itwasde— signedtoexpressionproteinofGM—CSFandproteinofSSgenesimultaneously．pIRES—GM—CSF／2SSwasi— dentifiedwithenzymedigestionand sequencing．Theresultsshowed thatCO—expressiongenevaccinepIRES— GM—CSF／2SSwassuccessfullyconsturcted，whichprovidesamaterialfoundationofrimmunomodulationofGM - CSF onDNA vaccine． K