生防菌Bs-916离子注入突变高效菌株筛选及抑菌防病效果.pdfVIP

生防菌Bs．916离子注入突变高效菌株筛选及抑菌防病效果 陈志谊，李德全 枯草芽孢杆菌(BacillusSubtilis)生防菌Bs．916能有效控制水稻纹枯病和稻 曲病，具有拮抗谱广、生长快，分泌产生抗生素等特点，并对水稻有抗性诱导作 用，因此Bs．916是一种能在水稻病害防治中发挥作用的生物防治因子。离子注 入是一种新的诱变源，具有损伤轻、突变率高、突变谱广的特点。离子束集能量 沉积、质量沉积、动量交换、电荷交换等多种因子为一体，能导致生物体直接和 间接的损伤，引起细胞内大分子的移位和重排，生成新的产物：也能使细胞表面 溅射，细胞形态变异，对细胞理化代谢乃至分子水平上的基因调控有深刻影响。 因此国内外均有离子注入微生物后，成功获得目标性能大幅度提高、遗传稳定的 菌株的研究报道。本研究利用N+离子注入的生物技术，对Bs．916进行诱变处理， 期望获得生物防治能力进一步提高的突变菌株。 通过研究盯离子注入生防菌Bs．916的诱变效果，结果表明：在被试的30 x一800×2．6X 1013N*／em2范围的10个剂量中，150×一250X2．6X1013N+／cm?为 较好的诱变剂量范围；重复离子注入处理是一种可有效提高诱变效率的处理方 法：在随机挑选的1300个被离子注入的突变菌株中，经过初筛、复筛和定量筛 选，筛选到11株拮抗性能比出发菌Bs．916提高10％以上的菌株，占筛选菌株总 数的O．85％；其中有1个突变菌株的拮抗能力提高了30．7％。 菌Bs．916分别在液体YPGA培养基中振荡培养。将新鲜菌液配成细菌悬浮液(含 菌量6．2×108cfu／m1)叶面喷雾在已人工接种纹枯菌的水稻植株上，喷施后15 天测定其对纹枯病的控病能力。结果表明：7个突变菌株对水稻纹枯病防效为 K33、H74、J71和E73等4个菌株表现较强的抑制纹枯病能力，病斑大小均低 于3．0cm，防效在91％以上，与出发菌Bs．916相比，防效提高率均超过16％。 选用4个离子注入突变菌株JTl、E73、H74、K33，进行防治水稻纹枯病田 间小区试验。采用处理前调查各小区纹枯病发病基数，处理15天后调查各小区 的病指，病穴率等，计算防效和校正防效的方法。试验结果表明，4个突变株校 6的 正防效为80．5582．87％。经方差分析，4个突变株校正防效比出发菌Bs-91 校正防效(77．86％)有显著提高；4个突变株之间校正防效无显著差异。 关键词：生防菌；Bs．916；离子注入；突变体；水稻纹枯病；防治效果