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新型树脂填料在中药化学成分分离中的应用 李振1，冯卫生18，郑晓珂2 (河南中医学院1．药学院；2．基础医学院，郑州450008) 应用。 关键词：Toyopearl；Diaion； 长期以来，中药化学成分的分离一直依赖于硅胶、氧化铝、聚酰胺等传统柱填 料，其在很大程度上制约了中药化学成分尤其是水溶性成分的研究。随着葡聚糖凝 胶、大孔吸附树脂等新型树脂填料的出现，中药化学水溶性成分研究得到迅速发展。 l HW-4 本文根据本实验室情况着重介绍TOSOH公司的Toyopear0系列树脂、 MITSUBISHI公司的DiaionHP一20大孔吸附树脂、MCI-GEL LH-20树脂在中药化学成分分离中的应用。 1新型树脂填料的原理及性能介绍 树脂是一种惰性的高分了聚合物，具有三元网状结构，不溶于酸碱、有机溶剂， 对氧、热和化学试剂稳定及机械强度高Ⅲ。具有选择性好、吸附容量大、再生处理方 便，吸附迅速、解吸容易等优点。 1．1Toyopearl系列 Toyopearl凝胶树脂总称为中压液相色谱填充物。多空半坚硬的特点使之能在高 流速下使用，适合用于制备分离并放大到工业纯化过程中，在中药有效成分特别是 水溶性成分、生物高聚物和生物化学产品分离提纯中广泛使用。其分离模式有四种： 系列)。 ToyopearlHW分子尺寸排除凝胶树脂：它是由乙烯醇和甲基丙烯酸酯聚合而成的 半坚硬的球状体，表面有许多烃基和醚键，亲水性好，并且形成许多官能团的吸附 点。适用于中药中水溶性化学成分的分离。它的分离原理主要是分子筛作用，根据 凝胶的孔径和被分离化合物分子的大小而达到分离目的。该系列树脂的颗粒大小规 8通讯作者：冯：E生，男，教授，博士，硕士生导师研究方向：中学。药活性成分研究及新药开发 Tel：86-371Fax：86-371E．mail：fwsh@hactcm．edu．cn 93 格主要有3种：s型20-40um超细颗粒，具有最高的分辨率；F型30-60“m中等 颗粒，用于经济型的纯化步骤；C型50-150um粗颗粒，用于产物的大规模捕获。 子交换、疏水反应、亲和树脂的基体。Hw凝胶树脂物理化学稳定性高，能够在强酸 碱中进行处理清洗，具有相当高的色谱分辨率，适用于低样品浓度，能改善多糖和 糖蛋白的分离纯化，且克服了通常凝胶流速慢和压力低的缺点。 ToyopearlIEC离子交换树脂：它以HW-65树脂为基体，键合上了不同性质的基 团。根据基团性质的不同分为阴离子交换树脂和阳离子交换树脂。离子交换层析有 很高的生物分子交换能力。所以往往选择它作为纯化的第一步。通过改变盐浓度、 盐类型、pH值、树脂种类，离子交换层析可以表现出很高的结合能力和洗脱选择性。 所以它也可以被用作纯化的中间步骤。它的一个重要特性是能浓缩结合组分，可用 在体积排阻层析之后，作为一个浓缩步骤，减少样品体积，提高样品浓度。它还可 用来处理非常稀的样品液，捕获目标分子。 苯基、丁基、己基成为四种不同类型的疏水反应树脂，疏水性依次增加。疏水反应 层析是生物分子纯化的重要手段，是体积排阻和离子交换层析的重要补充。其利用 蛋白质表面的疏水区域进行分离，用它来分离等电点和分子量接近的成分尤为有效， 也可以用在亲和层析之后，因为亲和层析无法分离有相似结构的蛋白质。 能团而形成亲和树脂。主要包括活性亲和树脂和反应性亲和树脂两类。亲和层析是 一种非常有效的蛋白质纯化方法。其分离的机制是基于蛋白质和某些特定分子具有 特异性的相互作用。除了生物特异性配体外(如酶底物、抗体、受体等等)，一些俗 称为类生物配体(如凝集素、染料)的物质也用在亲和层析中，而在固定化的金属 离子上进行的类亲和层析在蛋白质和多肽的分离纯化工作中越来越重要。另外，亲 和层析的选择性和效率极高。 1．2Diaion系列 大孔吸附树脂是一类不含交换基团具有立体结构的多孔性海绵状的有机高聚物 吸附剂，有极性和中极性之分，一般为白色球状颗粒，它的理化性质稳定，不溶于 酸、碱及有机溶剂。对有机物化合物的选择性较好使用寿命长，可反复利用，不受 无机盐类及强离子低分子化合物存在的影响。大孔吸附树脂为吸附和筛选原理相结 合的分离材料。它的吸附性能是由于范德华引力或生产