苯和二甲苯混合剂与单纯二甲苯对组织块透明效果的比较.pdfVIP

维普资讯 四川解剖学杂志 2005年第 12卷 第 1期 ·47 · · 技术交流 · 苯和二甲苯混合剂与单纯二甲苯对 组织块透明效果的比较 王立 袁芳 (湖北中医学院解剖组胚教研室 湖北武汉 430061) 石蜡包埋术是组织切片中最常用的技术，而组织 脱水、透明、浸蜡几个过程 ，处理步骤实际上就是一系 脱水透明方法和程序对后续包埋及切片产生重大影 列试剂的置换过程，其最终 目的是使组织块 内的水份 响。二甲苯是最普遍采用的一种透明剂，但是二甲苯 被能溶于石蜡的透明剂所取代L5J，浸蜡后才能使之包 很容易引起组织收缩、变脆、硬化，影响切片质量L1J， 埋成蜡块进行切片。然而，蜡块包埋的好坏会直接导 为改善这一情况，有一些代替二 甲苯的透明剂的报 致切片质量优劣，其决定因素取决于脱水、透明程度， 道[1]，苯作为一种常用透明剂也被实验室采用，其 各实验室一般都由自己的实践经验处理，没有统一的 特点是比二甲苯对组织收缩小，一般不会使组织过度 操作程序。作者通过对苯+二甲苯混合和单纯二甲 硬化变脆，经我们将苯与二甲苯作透明效果对 比，认 苯的研究比较，发现苯+二甲苯混合透明剂在实验室 为苯的透明效果明显优于二甲苯，且较二甲苯更适合 具有一定应用价值，其脱水透明时间为：无水酒精 作为透明剂在实验室使用，但苯在透明时间上要长于 3h，苯+二甲苯混合剂 1h。 二甲苯，一般在3h以上，不利于快速切片，为此，我们 为了探讨苯+二 甲苯混合透明剂的透明效果，我 将苯和二甲苯按一定比例混合作为透明剂，并与单纯 们 以组织的软硬程度选择了脑、心、肝、脾、肺、肾这 6 二甲苯对几种软硬程度不同的组织的透明效果进行 种组织作为对象，试图建立一种适合的脱水、透明模 比较，取得了较好的效果。 式。对于透明方式，经验证 明，不同的组织在二甲苯 1 材料和方法 透明的时间上是不同的，很难把握操作上的一致性。 1．1 取材固定：取大白鼠脑、心、肝、脾、肺、肾若 从表 1的结果可以看出，在透明0．5h和 1h二个时间 干个，分为5组，每个组织削成3mm左右厚的小块， 段，二 甲苯对脑、心、肝、脾、肺、肾不同组织的透明效 经 1O 福尔马林固定 24h备用。 果差异较大，透明时间1h，肝、脾、肾等实质脏器即出 1．2 试剂：7O 酒精、8O 酒精、95 酒精、无水 现透明过度现象。在透明0．5h时，混合透明剂的透 酒精、二甲苯、苯+二 甲苯 (2：1)、软蜡 (52℃)、硬蜡 明时间明显不足，不可取；而在透明1h和 2h两个时 (64℃)。 间段，苯+二甲苯混合剂对6种组织的透明效果相差 1．3 方法：将 固定后的组织块经流水冲洗后， 不大，透明效果较好，透明时间从 1h延长到2h均没 7O 酒精24h，80 酒精24h，95 酒精 24h，无水酒 发生透明过度现象，而二甲苯在透明0．5h，只有心和 清 I1h，无水酒清 Ⅱ2h，5组分别人苯+二甲苯(2：1) 肾的质量达A级，其余均为B级，透明1h，脑和肺达 和二甲苯内透明，其时间分别为苯+二甲苯0．5、1h、 A级，但肝、脾、肾这些较硬的组织却为 C级成为废 2h，二甲苯0．5h、1h。浸蜡包埋后根据切片质量观其 块，也就是说，对于不同组织，二