大鼠视交叉上核至视上核的纤维联系—免疫组化双重标记法研究.pdfVIP

L ’) 维普资讯 ＼一f 四JII解剖学杂志 1996年 第 4卷第 3期 j}薹T一I} ， j ： 2 、 ． I 一大 鼠视交叉上核至视上核的纤维联系 工-J 免疫组化双重标记法研究 L 王蕾 欧可群 操 高原 陈文 玉 — l 、 - h 一 - - — _ ● 华西医科大学组织学与胚胎学教研室 成都 610041 摘要 为了观察视交叉上核(SCN)的传出纤 1．材料和方法 维，本实验 采用兔抗 VIP及 AVP血清作为一抗对 大 鼠下丘脑 SCN 与视上核 (S0N)进行 免疫组化双 1．1 成年雄性 SD大 鼠 1O只 ，体重 250— 重染 色研究。结果观察到在 SCN尾段 ，位于腹侧份 350g，自然光照下饲养 ，水和食物随取 。动物 的VIP样神经纤维走 向SON，而在 SON 的腹侧份 在戊 巴比妥钠腹腔麻醉下经左心室升主动脉 及背侧份可见 VIP样纤维分布 ，并明显可见该纤维 插管灌注 。先用预热至 37℃的生理盐水冲洗 包绕AVP样神经元周围。由此本著者推测在 SCN 后 ，注入 4C的Zambonis固定液 (含 0．2 苦 至 SON之间可能存_饪直接的纤维联系，它可能是体 内血浆和神经垂体 的加压素 (VP)、催产紊 (0T)水 味酸 、2．5 多聚 甲醛)。取含有 SCN，SON 的 平呈现 24小时节律的又一原 因。 下丘脑组织块于 同一 固定液 中后 固定 2小 关键词 视交叉上核的传出纤维 视上核 时，再经 1O％、2O 、3O 蔗糖 固定液各 固定 鱼壅塑塑 大鼠 赡徘 12小时 。冰冻连续冠状切片 ，片厚 15m。 1．2 免疫染色用兔抗 VIP(1t6000，INC— 七十年代人们发现切 除或外科破坏视交 STAR 公 司 )及 兔 抗 AVP (1 t4000， 叉上核 (Suprachiasmaticnucleus，SCN)可使 CHEMICON 公司)血清为一抗 的 ABC法进 哺乳类动物 的摄食 ]、饮水 等节律发生改 行 (ABC药盒为 Vector实验室产品)。抗体 变或丧失 。1992年 windIe等 ]观察到伴随 的染色特异性经空 白，置换及对照等实验所 着摄食和饮水的节律性变化 ，血浆 、下丘脑及 证 实 。免疫染色过程如下s(1)兔抗 VIP或 垂体后叶的加压素 (vasopressi