肝细胞简易分离、培养和鉴定方法初探.pdfVIP

维普资讯 ·38 · SlOtlJANJoURNALOFANATOMYV0L 12 NO．1 2004 · 技术交流 · 脑组织局部灌注固定的改良及体会 代小思 (川北医学院解剖教研室 南充 637000) 目前已有动物脑组织的常规灌注固定技术L1J。 微镜下未见血细胞，表明血管内的血液已被生理盐水 陈浩宇等[a]又改进了脑组织的灌注固定技术，使固定 全部代替(符合生理盐水灌注要求)，随后进行固定液 脑组织的方法基本完善。由于脑组织耐氧能力很 全速(Bouin液)灌注，1分钟之后右心房流出的是淡黄 差L．]，就要求尽可能早地开始固定脑组织，才能更好 色的液体，1分钟 3O秒之后右心房流出的是黄色的 的保护好脑组织。为达此 目的，对 目前的脑组织局部 Bouin液体，表明血管内的生理盐水已被Bouin液体部 灌注固定技术作了适当的修改，并对右心房流出的液 代替(符合固定液快速灌注要求)，随后进行Bouin液 体作了仔细观察，现介绍如下，以与同行商榷。 减速(80滴／分钟)固定40分钟。从开始灌注生理盐水 目前对鼠和兔脑组织灌注固定时所使用针头的 至开始固定脑组织仅用3分钟30秒时间。 大小一般是 12～16号。为了保证单位时间通过较多 通过改大输液针头，减少胸部灌注，严格把握生 的液体，使生理盐水冲洗血管内血液的时间及固定液 理盐水冲洗血液及固定液冲洗生理盐水的时间，可以 冲洗血管内生理盐水的时间缩短，故在灌注固定脑组 达到尽快固定脑组织的目的。采用此法对 5只 SD 织中，可使用较大的输液针头，如SD大鼠使用 16号 大鼠脑组织进行灌注固定，效果 良好。 针头，兔使用2O号针头。 陈浩宇等是经升主动脉对前肢、头L1]颈及胸部 【参考文献】 进行局部灌注固定，本文经升主动脉全速灌注生理盐 (1)龚志锦，詹熔洲 ．病理组织制片和染色技术EM]．上海：上海 水，剪开右心房，再钳夹主动脉弓与胸主动脉交界处， 科学技术出版社，1994．3～24． ~23OvergaardK，MedellP．Influenceofdifferentfixationproce— 开始对前肢、头、颈部进行局部灌注固定，就减少了胸 duresonthequantificationofinfarctionandoedemainarat 部灌注固定，缩短了循环，缩短了时间。 modeOSstroke-[J]．NeumpatholApplNeurobiol，2000，26： 本实验选择 5只6个月大小的SD大鼠，经升主动 243— 25O。 脉全速灌注生理盐水，1分钟之后右心房流出的是淡 [3]陈浩宇，高亚兵，彭瑞云等 ．一种改进的大鼠脑组织灌注固定 血水，1分钟30秒之后流出的液体隐约可见血色，2分 方法[J]．军事医学科学院院刊，2000，26(3)：208~212． 钟之后流出的液体是无色的生理盐水，此时抽取右心 [4]王忠城．脑血管病及其外科治疗EM]．北京：北京出版社， 】994．13～ 】4． 房内流出的液体，进行涂片、固定及血细胞染色，在显 肝细胞简易分离、培养和鉴定方法初探 ·技术交流·