大豆对胞囊线虫的抗性和分子标记研究.pdfVIP

分子植物育种，2007年，第5卷，第5期，第701-703页 MolecularPlantBreeding,2007,Vol.5,No.5,701-703 博士学位论文摘要 AbstractofDissertationforPh.D 大豆对胞囊线虫的抗性及分子标记研究 博士研究生：王惠 博士生导师：段玉玺 沈阳农业大学，沈阳，110161 通讯作者，wanghuisynd@ 摘 要 本文首次利用我国特有的抗病品种小粒黑豆与辽宁省的主栽品种辽豆10配制杂交组合，以F代群 2 体为试验材料，系统地应用分离群体分组分析法(BulkedSegregantAnalysis,BSA)寻找与大豆胞囊线虫3号 生理小种抗性基因相关的DNA分子标记以及同工酶标记和低分子肽/氨基酸标记，为我国的大豆抗胞囊线 虫病育种提供理论指导。主要研究结果如下： 1.利用杂交技术构建了大豆胞囊线虫抗性的分子表达平台。本研究配制了辽豆 10小粒黑豆的杂交组 × 合，并利用海南加代快速繁殖，应用毒力最弱的大豆胞囊线虫3号生理小种对F代群体进行抗性鉴定和移 2 栽，为大豆对胞囊线虫抗性分子标记的筛选提供了均一遗传背景的试验材料。对该组合进行田间抗性鉴定， 结果表明符合抗感分离1:3的比率，表明在辽豆10背景下小粒黑豆对大豆胞囊线虫3号生理小种的抗性是 由一对以上的隐性基因控制的。 2.应用分离群体分组分析法在辽豆10和抗大豆胞囊线虫的核心抗源中获得了一个与感病性密切相关 的RAPD标记S11。应用143个随机引物，对由小粒黑豆和辽豆10配制的杂交组合的抗感亲本和构建的 700 抗感池进行筛选，有92个引物产生了RAPD扩增产物，25个引物产生了RAPD多态性，其中一个引物产生 了与抗大豆胞囊线虫基因密切相关的特异性DNA片段S11，经多次重复验证，该片段在感病亲本及感病 700 池中被特异性扩增，而在抗病亲本及抗病池中未产生该片段。利用S11 对不同抗性大豆品种进行分子标记 700 鉴定和辅助选择，验证了该特异性片段与大豆胞囊线虫3号生理小种抗性紧密相关，可以用于抗胞囊线虫大 豆新品种的分子辅助选择育种。 3.利用BSA法对 11个黑色种皮的大豆品种和 12个黄色种皮的大豆材料的基因组DNA进行RAPD 分析，获得一个与大豆黄色种皮相关的特异DNA片段S79500。采用该标记对辽豆10PI437654杂交后代种 × 皮颜色有分化的群体进行检测，结果表明这个RAPD标记具有较高的重复性和稳定性，可用于辅助选育优 良的黄色种皮的大豆新品种。 4.获得了一个与大豆胞囊线虫3号生理小种抗性基因相关的SSR分子标记Satt187。应用204对SSR 引物对辽豆 10小粒黑豆进行SSR分析，31对引物产生了扩增产物，其中15对具有多态性，从中筛选到一 × 个与大豆胞囊线虫3号生理小种抗性基因相关的分子标记Satt187，其片段大小为172bp和 176bp，为共显 性标记，在F代分离群体中的分离比为1:2:1，呈孟德尔式遗传。应用该标记对辽豆10小粒黑豆F代分离 2 × 2 群体进行分子标记鉴定和辅助选择，在抗病单株中均检测到标记带Satt187-176bp的存在，而在感病单株中 检测到有Satt187-176bp和Satt187-172bp两种标记带或仅有Satt187-172bp的标记带存在，分析表明该标 记具有抗胞囊线虫分子标记辅助选择应用的前景。 5.系统地研究了辽豆10小粒黑豆和辽豆10PI437654两对组合的亲本及其杂交后代植株体内防卫反