糖化黑曲霉复壮方法地研究.pdfVIP

( ) 2000 年第 3 期 总第 138 期 酿 　　酒 　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 No3 　2000 　Tol138 　　　 NIAN GJ IU ·45 · 糖化黑曲霉复壮方法的研究 1 2 1 1 郝 　林 ,陈立新 ,司俊玲 ,贾 　莉 ( 1 山西农业大学食品科学系 , 山西 太谷 030801 ;2 山西省太谷县科委 , 山西 太谷 030800) 摘要 :采用透明圈法对糖化黑曲霉AS3324 和AS34309 的复壮方法进行研究 ,选出了三种适合 的筛选培养基 ,确定了具体的操作步骤 。复壮后菌株的麸曲糖化酶活力分别比退化的出发菌 株的麸曲糖化酶活力提高 45 %和 44 % 。 关键词 :透明圈;糖化酶活力 ;黑曲霉 ;复壮 + + ( ) 中图分类号 :TS2611 2 ;TS2611 5 文献标识码 :A 　　文章编号 :1002 - 8110 2000 03 - 0045 - 03 黑曲霉是我国白酒及食醋企业使用的重要糖化菌 。在一些中、小企业中 , 由于缺少微生物学方面的 专业人员 ,对微生物的遗传变异及菌种退化缺乏了解 , 因而对生产菌种退化无力解决 ,只好定期购买菌 种 。实际上 ,菌种退化是指群体中退化个体在数量上 占一定数量后 ,所表现出的菌种生产性能的下降。 因此完全有可能采取一些相应措施 ,使退化菌种复壮 。狭义的复壮是指已发生退化的菌种 ,通过纯种分 离和性能测定等方法 ,从退化的群体中找出尚未退化的少数个体 , 以恢复该菌种原有典型性状的一种措 施 。广义的复壮则是在菌种的生产性能尚未退化前就经常有意识地进行纯种分离 , 以期使菌种的生产 性能逐渐提高 ,它实际上是一种利用自发突变在生产中进行选种的工作 。 本研究根据上述原理 ,经过对有关资料介绍的方法进行试验比较 ,得到了一种较好的透明圈筛选方 法 。 1 　材料与方法 11 　菌种 AS3324 和 AS34309 均为本教研室多年传代保藏的材料 。 12 　设备及器皿 高压蒸汽灭菌器 、恒温培养箱 、电炉 、酒精灯 、三角瓶 、培养皿 、试管 、吸管及糖化酶活力测定所需用 具等 。 13 　培养基及试剂 A 培养基 : 可溶性淀粉 10g 、NaNO lg 、KC1 05g 、K HPO 05g 、MgSO 7H O 05g 、琼脂 20g , 加水至 3 2 4 4 2 1000ml 、自然 p H 。 B 培养基 :蛋白胨 10g 、淀粉 10g 、NaNO 3g 、KCl 05g 、FeSO 001g 、K HPO 1g 、MgSO 05g 、蔗糖 20g 、琼 3 4 2 4 4 脂 18g 、水 1000ml 。 C 培养基 :NaNO 3g 、K HPO 1g 、KCl 05g 、MgSO 05g 、FeSO 001g 、琼脂 20g ,麸皮 150g 加少量水浸泡 3 2 4 4 4 30min 后用纱布过滤 ,再次加水过滤一次 ,将两次得到的麸皮浸出液加水定容至 1000ml [ 1] 。 D 培养基 :可溶性淀粉 4g 、蛋白胨 10g 、NaCl 5g 、牛肉膏 3g 、琼脂 20g 、加水至 1000ml ,p H72[2 ] 。 碘液 :首先将碘化钾 2g 溶于 5 - 10ml 水中 ,再加入碘 1g ,使其溶解