蝴蝶兰组织培养快繁技术研究.pdfVIP

·生物技术· 蝴蝶兰组织培养快繁技术研究 张 颖1，郭晓东2，王 芳1，张 楠1 (1．宿迁学院教育系，江苏宿迁，223800；2．哈尔滨工业大学后勤集团，黑龙江哈尔滨150001) 摘要：以蝴蝶兰花梗为初次诱导外植体，对蝴蝶兰的离体繁殖途径进行研究，建立蝴蝶兰 5 0．3 植株再生系统。结果表明：初代培养基：MS+6一BAmg／L+NAAmg／L+蔗糖30g／L+琼 7 1．0 脂6g／L的萌芽数最多；增殖培养基：MS+6-BAnag／L+NAAmg／L+蔗糖30g／L+琼脂 6 KC+IBA1 mL／L叶片数和增殖系数最高；生根诱导培养基：改良1／2 mg／L+ g／L+椰汁200 NAA 0．5训L／L生根效果最好。 关键词：蝴蝶兰；花梗；外源激素；组织培养 中图分类号：S 蝴蝶兰(Phalaenopsishybrid．)为兰科(Orchidaceae)纸擦干，带入超净工作台，用75％酒精从一端到另一端 擦拭1遍后切成茎段(茎段长度以能够完全浸入消毒液 蝴蝶兰属(Phalaenopsis)植物，原产地为热带和亚热带， 天然分布于亚洲和大洋洲。至今，全世界发现的野生蝴 为宜)，采用2次消毒处理方法。首先用75％酒精浸泡 蝶兰原种有40多个，分布于亚洲和大洋洲热带和亚热 30s，再用0．1％的升汞消毒7min，无菌水冲洗3次，用 带地区[1]。现市场上销售的蝴蝶兰多为杂交改良后的 无菌滤纸吸干水分后再次放人0．1％的升汞消毒7min， crn 新品种。蝴蝶兰色彩丰富、形态优美、花期长，被列为高 无菌水冲洗5次，用无菌滤纸吸干水分，切成1．5～2 档名贵花卉，有“兰花皇后”的美誉。蝴蝶兰属于单茎性 长的茎段，每茎段留侧芽或茎节，并将茎段两端接触消 气生兰，极少发育侧枝，形成种子少且困难，不易进行常 毒液的切口剪去。 规繁殖，因此组织培养成为蝴蝶兰高效繁殖的重要手 1．2．3外植体接种、芽的诱导把灭过菌的已开花花梗 段[2]。该研究以蝴蝶兰花梗为材料进行组织培养，建立 外植体按照花梗自然生长方向插入下面配方的培养基 了蝴蝶兰植株再生系统，为工厂化育苗提供有效途径。 中，配方为MS基本培养基，蔗糖30g／L，琼脂6g／L，附 1材料与方法 加3个浓度的6-BA：3、5、7mg／L，NAA的浓度为 1．1试验材料 0．3n培／L，以不加入6一BA为对照。每处理10株，3次 供试材料为红花系蝴蝶兰，选用2种花梗，已开花 重复，30d后统计各处理的萌芽率。 花梗(下端带有休眠芽)和花蕊尚未长出但已完全抽出 1．2．4继代增殖选取长为1ClTI左右，生长状况一致 的花梗。 的单芽作为接种材料进行继代培养。每处理10株，3次 o、1．5 1．2试验方法 重复。生长素选用NAA，浓度分别设为：0,0．5、L rng／L；细胞分裂素选用6一BA，浓度设为：0、5、7、9mg／L。 1．2．1外植体的选择选用2种花梗，已开花花梗(下 端带有休眠芽)和花蕊尚未长出但已