猪圆环病毒2型Taqman荧光定量PCR检测方法的建立及应用.pdfVIP

猪圆环病毒2型Taqman荧光定量 PCR检测方法的建立及应用 郑敏1，2黄梅清1,2 吴南洋1,2* 陈少莺1,2 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福州350013 2.福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心，福州350013 摘要：参照GenBank收录的PCV20RF2基因设计合成了引物和Taqman探针，建立了PCV2 TaqMan荧光定量PCR检测方法，对临床确诊PCV2的病料和30份临床疑似感染PCV2的病料进 行检测，同时与常规PCR检测方法进行比较。结果显示，TaqMan荧光定量PCR检测方法灵敏度 可达4.5×103拷贝/μL，比普通PCR检测方法高10倍；对30份疑似感染PCV2病料的检测表 明，TaqMan荧光定量PCR和普通PCR检测阳性率分别为66.7％和56.7％，两者符合率90％。应用 TaqMan荧光定量PCR检测方法检测PRV、CSFV、PRRSV均为阴性，无交叉反应；表明该方法具有 灵敏度高、特异性强、重复性好等优点，可用于PCV2的流行病学调查和临床诊断。 关键词：猪圆环病毒2型(PCV2)；TaqMan；荧光定量PCR 眦型PRRS 芷空