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生物降解花生粕中黄曲霉毒素B_1的研究 科技动态 生物降解花生粕中黄曲霉毒素B1的研究 王 玉 陈现伟山东临沂大学生命科学学院 摘 要 为探讨生物降解黄曲霉毒素的作用，试验采用在花生粕中接种黄曲霉菌，并在30 ℃环境中培养7 d，使其产生黄曲霉毒素，然后分别采用高温高压法、添加1 %乳酸菌和1 %酵母菌3种方法处理试样，并测定其黄曲霉毒素B1（AFB11，但仍有72.3 %的AFB1存在；经乳酸菌30 ℃厌氧培养72 h，可使99.4 %的AFB1得到破坏；经酵母菌30 ℃培养72 h可使83.4 %的AFB1得到降解，且乳酸菌的处理效果显著优于酵母菌的处理效果。 关键词 乳酸菌 酵母菌 花生粕 黄曲霉毒素B1 中图分类号： S 816.32 文献标志码： B 文章编号：1002 - 2813（2012）01 - 0080 - 02黄曲霉毒素(AFT) 是一类能够致癌、致畸和致突变的真菌毒素，被世界卫生组织列为一级致癌物，主要包括AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2、AFB2a、AFG2a、AFBM2a和AFGM2a等，其中以黄曲霉毒素B1（AFB1）毒性最强, 危害最大。AFT 污染是全球性的问题，在发展中国家尤为严重。花生粕在生产、储存、运输及加工过程中极易受黄曲霉菌的污染。受霉菌污染的花生粕一方面使其饲用价值降低，甚至失去商品价值,造成巨大的经济损失。另一方面由黄曲霉菌产生的毒素易引起人和动物中毒。目前对AFT去毒方法除了传统的物理吸附和化学处理方法外，生物学去毒方法以其安全、有效和环保的特点倍受关注，具有较好的发展和应用前景。 1.2 试验仪器 霉菌培养箱(MJ-160B-Ⅱ型)；远红外快速烘干箱(YHG500-BS-Ⅱ)；AFT测定仪(EAB1-95型)；植物粉碎机(FZ102型)。1.3 试验方法1.3.1 试验分组与处理 将花生粕粉碎后放入烘干箱中130 ℃灭酶，烘干，然后加水，使水分含量为20 %，接种黄曲霉菌，并混合均匀，平均分为A、B、C和D 4份，其中A作为空白组。放入霉菌培养箱中30 ℃培养7 d，检测AFB1的含量。将经培养后B组花生粕再连续培养72 h后，进行高温和高压处理（121 ℃，102.9 kPa，30 min）；C组花生粕添加1 %乳酸菌，混匀，并进行厌氧密封；D组添加1 %酵母菌，混匀。将A、B、C和D放入霉菌培养箱中30 ℃培养72 h，检测AFB1含量。每组检测样品数量为3。1.3.2 AFB1检测 AFB1的检测使用AFB1 酶联免疫定量测试盒进行测定，具体方法按照试剂盒测定程序进行，每处理取3个平行样进行AFB1含量检测。1.4 试验数据统计与分析 采用SPSS13.0统计分析软件对试验数据进行方差分析（ANOVA），LSD法组间比较。P＜0.05为差异显著，P＜0.01为差异极显著；所有试验结 收稿日期：2011 - 08 - 01通信作者:陈现伟 1 材料与方法 1.1 试验材料 花生粕:市售,经检验无霉菌污染和洁净的优质花生粕；AFB1酶联免疫定量测试盒: 江苏省苏微微生物研究有限公司，批号甲醇:分析纯；无水乙醇：分析纯；黄曲霉菌：由实验室分离并鉴定的AFT菌株；乳酸菌: 由实验室分离、鉴定和培养的嗜热链球菌菌株；酵母菌: 由实验室分离、鉴定和培养的食用酵母菌株。 果均以平均数±标准误差表示。 80 饲料研究FEED RESEARCH NO.01,2012 科技动态 2 结果与分析 表1 AFB1检测试验结果 μg/kg组别A组B组C组D组 培养7 d 32.62±3.5733.07±3.5732.78±3.5733.52±3.57 处理后72 h 52.97±3.2138.30±4.76*0.32±1.57**8.77±2.34** 注：表中上标*表示与空白组比较差异显著；上标**表示与空白组比较差异极显著。 从表1可见：在含水量20 %的花生粕中接种黄曲霉30 ℃培养7 d，各组均有AFB1的产生，但经显著性检验各组间差异并不显著。经连续培养72 h后，A组AFB1含量可达52.97 μg/kg。B组在经高温和高压（121 ℃，102.9 kPa，30 min）处理后AFB1的含量为38.3 μg/kg，比对照组降低了27.7 %；C组和D组AFB1的含量分别为0.32 和8.77 μg/kg，比对照组分别下降了99.4 %和83.4 %，均极显著低于对照组。C组AFB1的含量显著低于D组。说明AFB1经121 ℃，102.9 kPa，30 min的高温和高压的处理可显著破坏部分AFB1，但仍有72.3 %的AFB1存在，而利用生物处理方法可较好地破坏大部分的AFB1。经乳酸菌处理可使花生粕中99.4 %的AFB1得到破坏，经酵