鲤JAK2基因分子克隆及组织表达分析.pdfVIP

第 35 卷 第 1 期 广东海洋大学学报 Vol.35 No.1 2015 年 2 月 Journal of Guangdong Ocean University Feb. 2015 鲤 JAK2 基因分子克隆及组织表达分析 1,2 2 1 2,3 3 付 友 ，高 谦 ，文春根 ，吴 平 ，刘德立 （1. 南昌大学生命科学与食品工程学院，江西 南昌 330031 ；2. 中国科学院水生生物研究所，淡水生态与生物技术 国家重点实验室，湖北 武汉 430072 ；3. 华中师范大学生命科学学院，湖北 武汉 4300790 ） 摘 要：采用同源克隆策略和 RACE-PCR 技术，克隆得到可能的鲤（Cyprinus carpio ）两面神激酶 2（JAK2 ）基 因的 cDNA 全长序列，包括 3 378 bp 的开放阅读框，732 bp 的 5-非编码区，529 bp 的 3-非编码区，总长度达 4 639 bp。开放阅读框可编码 1 125 个氨基酸，推测分子质量和理论等电点分别为 129.33 ku 和 6.99。同源性分析显示， 克隆的鲤鱼基因与斑马鱼（Danio rerio ）JAK2 同源性最高，其氨基酸序列同一性和相似度分别达 89%和 95%。结 构域预测表明，所编码氨基酸序列包含 FERM、SH2 及两个酪氨酸激酶结构域，这 4 个结构域也保守地存在于其 他脊椎动物的 JAK 分子中。高级结构预测显示，鲤 JAK2 主要包括 α-螺旋（α-helix）、β-折叠（β-sheet）和连接环 （loop）等 3 类结构元件。脊椎动物 JAK 分子系统进化树显示，JAK1、JAK2、JAK3 和 TYK2 等 4 类 JAK 分子分 别聚类，鲤 JAK2 处于 JAK2 支系中，与所有其他的鱼类 JAK2 聚为一大支，并与两栖类和哺乳类组成的另一大支 构成姊妹群，表明它们具有共同的祖先基因，为直系同源关系。实时荧光定量 PCR 检测结果表明，鲤 JAK2 在皮 肤中表达量最高，其次是肠、血液和脑，而在肌肉、鳃、头肾、心、肝、脾中表达量较低；鲤 JAK3 在脾中表达 量最高，在其他组织中表达量均很低，甚至未检出。 关键词：鲤；JAK2 ；JAK3 ；基因克隆；组织表达分析 中图分类号：Q78 ；Q959.46+8 文献标志码：A 文章编号：1673-9159（2015）01-0008-10 Cloning and Expression Analysis of JAK2 Gene in Common Carp, Cyprinus carpio 1, 2 2 1 2, 3 3 FU You , GAO Qian , WEN Chun-gen , WU Ping , LIU De-li （1. School of Life Science and Food Engineering, Nanchang University, Nanchang 330031, China; 2. State Key Laboratory of Freshwater Ecology and Biotechnology, In