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秸秆好氧厌氧耦合发酵工艺中厌氧发酵的初步研究
扬雪霞陈洪章李佐虎
00080)
(中科院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室,北京1
捕-Jt-本研究采用固态发酵和屣氧微粒相结夸的工艺来转化玉米秸秆生产饲料,主要研究了厌氧微贮阶
段菌种的筛选,糖蜜浓度和接种量甘厌氧发酵过程的影响.考察了pH、乳酸、生长曲线和还原糖等一
些生化特性.结果表明,除发酵乳杆菌H9外,其余各茵均适合厌氧发酵,耱蛮浓度升高增强徽贮效果
5%的接种量既能启动厌氧发酵.
关键词玉米秸固态发酵厌氧发酵
1前言
农作物秸秆是植物光合作用的产物.主要由纤维素、半纤维素、木质素组成。目前,除~小部分
用作反刍动物的饲料外.大部分被焚烧或在自然界中慢慢降解。如采取有效措旆对这些秸秆加以利用,
使其转化为蛋白饲料,不仅能避免焚烧引起的污染,。也能解决饲料资源的不足。由于秸秆能量低、含
氮低、消化率低等特点,使其在饲料行业中的利用受到限制。人们已采用各种方法来改善秸秆的营养,
增加其饲喂效果。固态发酵由于其无废水产生,无须较高的控制设备.产品直接饲喂等优点,是目前
生物转化秸秆中常用的技术之一,已有许多较好的研究结果‘I-2),秸秆的固态发酵中大多采用丝状真
菌,这些微生物能产生降解植物细胞壁的酶.分解纤维素、半纤维素和木质素,同时合成自身的菌体
蛋白.所得发酵产品既富含酶类,又富集了菌体蛋白。但经过固态发酵后的产品一般适口性较差,动
物不爱采食,而且,采用丝状真菌进行发酵,培养时间较长,发酵中容易染菌,特gⅡ在工业生产中更
是如此。如果对固态发酵后的秸秆进行后处理,增强保存效果,增加其适口性,将更能增加其消化和
吸收。用微生物发酵贮存秸秆也叫微贮,主要依靠乳酸菌发酵,使pH值下降。厌氧条件下的乳酸发
酵及形成的较低的pH能抑制杂菌的污染,较好地保存饲料。同时.乳酸发酵使粗硬的秸秆变软.有
酸香味,刺激家畜食欲,提高采食量。添加纤维素酶的微贮近年来发展较快,加酶微贮能增加可发酵
底物的量.从而增强微贮效果.特别适用于一些含糖量较低的秸秆.增加秸秆的消化率和适口性o,。
本文采用固态发酵和厌氧微贮相结合的工艺来生物转化玉米秸秆,希望通过这一工艺能提高秸秆的营
养价值.增强其适口性。本研究主要报道了厌氧微贮阶段菌种的筛选,糖蜜浓度及接种量对厌氧发酵
的影响。
2材料与方法
2.1材料
ATCC34541),
好氧发酵用菌种:斜卧青霉Ju.Al和黄孢原毛平革菌(Phanerochate
chrysosporium
保存在PDA斜面上。
No.1保存在MRS培养基上
a
5.5,固:液。l:2.5
MgSo|),pH
0.19
2.2方法
固态发酵:发酵培养基灭菌后.接入丝状真菌的液体种子.35C下培养4天。
微贮:固态发酵结束后,直接接入乳酸菌进行厌氧发酵,40C。
2.2.1分析方法
纤维素酶活力测定(FPA酶活力)“),
厌氧发酵过程中·取样l克湿发酵料,放入9无菌水中,混匀后,梯度稀释,用平板菌落计数法
计数a剩余部分离心t取上清液分析还原糖、pS、乳酸。还原糖测定:3,5-二硝基水杨酸法。乳酸
and
测定采用SteinsholtCalbert法01。
3结果和讨论:
3.1厌氧发酵菌种的筛选
黾
皇
图1菌的生长曲线 图2乳酸的生成曲线
毛
图3pH变化曲线 图4还原糖变化曲线
好氧发酵结束后.直接接入乳酸菌进行厌氧发酵.发酵结果如图l-4所示。从菌的生长曲线f图1)
看,各菌种均能在较短的时间(】2小时)内迅速繁殖,选到对数期,I天后达稳定期。乳酸的产生如
图2,随发酵进行,乳酸含量呈增加趋势,除发酵乳杆菌No.9合成乳酸较慢,而且乳酸含量低外,
其余菌种均能快速合成并积累乳酸。pH变化曲线如
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