硫酸盐还原菌(SRB)的变异及其腐蚀行为的研究.pdfVIP

硫酸盐还原菌(SRB)的变异及其腐蚀行为研究 刘靖刘宏芳冯绪文许立铭郑家桑 30074) (华中理工大学化学系，武汉，4 摘要本文研究了在不同pH介质中SRB的变异规律以及变异茵对碳钢腐蚀的影响．研究结 果表明，耐酸菌和耐碱菌其活性均比原始茵强；变异菌及原始菌的腐蚀对比实验表明，耐 碱菌对碳钢腐蚀最严重，其次是耐酸菌，两者均犬于原始菌；在低甜条件下获得的耐酸茵， 主要以菌蓉形式生长，茵体呈球形，细菌茸落有鞭毛，短时间(“天)腐蚀实验就能观察 到碳钢表面有明显的点蚀孔，腐蚀产物中硫元素分布的电子探针分析表明其分布不均匀： 耐碱菌与原始茵相比形体发生了很大变化，菌体变大、变长，相同腐蚀时间后碳钢以均匀 腐蚀为主，腐蚀产物中硫元素分布出耐酸菌均匀。 关键词SRB，细菌变异，腐蚀，碳钢 ． 1 前言 中原油田二次采油需要大量的回注水，这些回注水主要来源于油田产出液经油水分离 后所得到的酸性高矿化度水和炼油厂废水的再利用，这些酸性污水中酸度高而且溶解了大 量金属离子，将对地层和水生态系统产生重要影响“1。这种酸性污水对油田注水管有很大的 腐蚀作用。中原油田水体改性技术，己在中原油田l【个油田区块推广使用，使油田腐蚀得 到减缓，同时也使油田注水水质得到改善。水体改性技术的实质是将清水、生活污水、炼 厂废水与产出污水混合，用石灰乳将水的pH由6．5左右调到9．6一lO使水的腐蚀性能降低， 同时将水中一些有害离子沉淀下来““。水体改性前．油田系统中生长着SRB，改性初期未 发现SRB，但经过一段时间后发现系统中SR8大量繁殖。SRB是主要细菌之一，在腐蚀过程 中起主要作用。为了探讨已适应碱性环境的SRB对碳钢腐蚀的影响，实验室在培养基中对 SRB进??了驯化试验．研究了SR8对酸碱的适应性、变异规律以及变异菌对碳钢腐蚀的影响， 为防治SRB提供理论依据。 2实验方法与材料 2．1菌种来源 取中原油田污水，将此污水经过离心分离和培养基富集，在氢气域中琼脂乎扳上培养 并分离出SRB单菌落，挑取单菌落培养后再进行平板分离，如此重复数次，直至透射电镜 下观察到的细菌形貌一致，确定为纯种．并将其冷藏保存作为原始菌。 2．2培养基及培养条件 采用API—RP38推荐的培养基和实验条件…。其组成如F：乳酸钠4，0ml／1：酵母漫汁 0．2 1．0ml／／1：维生素C0．1∥l：MgS04·7H20g／1；如HPn0．01g／l；NaCI10．0 g／L； FeSO，·(NHI)2S04·6H200．2g／I。 将培养基DH值调至7．O一7．2，在1．4kg／cm：灭菌锅中消毒20min，冷却后加入经紫外 消毒的硫酸亚铁铵。 2．3SRB生长曲线的测定 取～定量原始SRBr小口盐水瓶中，加入灭菌培养基．在37℃F恒温活化培养48小时， 一350一 观察SRB的生长状况。如果SRB生长正常，即可用经过消毒的注射器取出lml该菌液加入 细菌瓶(北京华兴化学试剂厂)中，并进行逐级稀释，再取出其中第三或第四级细菌瓶中 的细菌2ml用作菌种(根据经验取其第三或第四级菌量可避免菌量过大生长过快不易准确 测出其对数生长期，或因无菌量而引起实验失败)，取其2ml菌液加入经过灭菌消毒的盐水 瓶中，充满培养基后进行恒温培养，用细菌瓶测定不同时期菌量随时间的变化，绘出SRB 生跃曲线。 2．4不同pH值条件下SRB的驯化实验 取己消毒的小口盐水瓶10个，加入无菌培养基，用lMHCI和IMNaOH调节pH，使之 从3．0—12．0逐渐升高，盖好橡皮塞，将己在374C恒温F活化24小时的SRB菌种，各取1ml， 用经消毒的注射器注入上述小口盐水瓶中，在37℃下恒温培养，观察并记录SRB的生长情 况。将在最高和最低pH下获得的SRB保存作为再一次驯化试验的菌种，重复驯化试验四次， 将最后获得的耐酸菌和耐碱