金纳米微粒-血清蛋白体系光谱特性与研究.pdfVIP

第30卷，第11期 光谱学与光谱分析 V01．30，No．11，pp7—8 2010年1 and November，2010 1月 SpectroscopySpectralAnalysis 金纳米微粒一血清蛋白体系的光谱特性研究 郭艳丽1’2，孙 凤2，袁洪林1，阎宏涛2 L西北大学大陆动力学教育部霞点实验窄，陕西西安710069 z．西北大学合成与天然功能分子化学教育部蓬点实验室， 西北大学化学与材料科学学院，陕西西安710069 摘要采用荧光光谱、吸收光谱和共振光散射光谱(RLS)研究了金纳米微粒(GNPS)分别与牛血清白蛋白 (BSA)和人血清白蛋白(HSA)的相瓦作用。荧光光谱结果表明金纳米对血清蛋白的荧光具有猝灭作用，猝 灭符合SterrrVolmer方程。讨论-r金纳米微粒对血清蛋白荧光猝灭的机理，该荧光猝灭为动态猝灭。金纳 米一血清蛋白体系的共振散射强度显著增大，且共振光散射信号的增强与蛋白质的含量呈线性关系，由此可 期望建立一种金纳米为探针共振光散射测定蛋白质的新方法。 关键词金纳米微粒；牛血清白蛋白；人血清白蛋白；荧光光谱；共振光散射光谱 文献标识码：A 文章编号：1000-0593(2010)11—0007-02 荧光光谱结果：为了避免金纳米微粒的散射峰对血清 直线。结果表明：随着温度的升高，猝灭曲线的斜率增大， nn2。BSA和HSA分别即对BSA和HSA的猝灭常数增大(见表1)；再结合吸收光 蛋白荧光的影响，实验选择k为290 在354和367nlTl处产生内源荧光，而金纳米溶液本身没有谱，BSA和HSA的特征吸收没有随着GNPS的加入而产生 荧光。加入不同鼍的金纳米微粒溶液后，血清蛋白的荧光发 变化。所以GNPS对BSA和HSA的猝灭类型应该是动态猝 射峰的形状元明显变化，但荧光强度逐渐减弱，说明金纳米 灭。 对血清蛋白的荧光有猝灭作用，并且这种猝灭效应随着金纳 Table1 different 米微粒溶液浓度的增大而增大。 Quenchingconstants(娲)attemperature 对于动态猝火和静态猝灭，Stern-Volmer方程 F0／F一1+KQ[CQ1 其中F0为猝灭剂(Q)不存在时荧光体发光强度，F为加 入猝灭剂后的的荧光强度，KQ为猝灭常数。 以Fo／F对Au(Ⅲ)浓度做图，可以得到两条直线。说明 金纳米微粒对两种血清蛋白的猝灭符合SterrrVolmer方程。 将有关数据代入SterrrVolmer方程，求得的金纳米微粒对 BSA和HSA的荧光猝灭常数分别为：1．10×104，1．16× 104 共振光散射光谱结果：分别进行了BSA、HSA、金纳米 L·tool～。实验制备的金纳米微粒溶液是一种带负电的 微粒溶液以及不同浓度BSA或HSA和金纳米微粒混合溶液 疏水性胶体，在生理pH7．4条件下，BSA和HSA带有负电 荷。金纳米微粒与血清蛋白之间存在着较强的库仑斥力，它 的共振散射光谱测定，如图1所示(以BSA为例)：BSA的共 们之间形成肇态复合物的可能性不大。因此，推测金纳米微 振散射光谱强度很弱，而GNPS本身有一定的共振散射强 粒对血清蛋白的荧光猝灭可能是动态猝灭，而并非是形成了 度。金纳米微粒溶液和BSA混合后，体系的RSL强度增强， 基态复合物的静态猝灭。 而散射峰的位置和形状没有明显变化，最大散射峰位于399 为进一步证明其猝灭机理。实验分