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广西师范大学学报(自然科学版)
2003年10月 JOURNALOFGUANGXINORMALUNIVERSITY Vol.21 No
使用Y-磷酸错为载体固定化血红蛋白的表征
耿利娜,李 娜 ,李克安
(北京大学 化学与分子工程学院 化学生物学系,生物有机分子工程教育部重点实验室,北京 100871)
研究蛋白质在界面上行为具有很大的理论意义和实际应用价值,但由于生物分子的复杂性,尚存在很
多未知领域L[l1因而,以r-磷酸错为载体,血红蛋白的固定化研究不仅可以有效地制备层状化合物磷酸错
生物纳米复合材料,而且为研究蛋白质在界面上的吸附行为提供有价值的信息 我们以Y-磷酸错为载体,
将血红蛋白成功地嵌人到载体层间,制备了固定化血红蛋白通常固定于载体上的蛋白质分子,其天然结
构会变化,甚至会失活.鉴于红外光谱和圆二色性光谱能够灵敏地反映蛋白质分子二级结构特征以及特征
的氢键结构Lz1,本工作借助于红外光谱和圆二色性光谱来检测蛋白质分子的结构变化性质X一射线衍射分
析手段分析纳米复合材料的晶体结构变化,并建立血红蛋白在各种载体上的吸附等温线等,以求表征固定
化的血红蛋白分子.
1 实验部分
1.1 固定化血红蛋白的制备
①y-磷酸错的合成;②Y-磷酸错的预处理;③血红蛋白的固定.
1.2 固定化血红蛋白的表征
分别使用VECTOR22FT-IR光谱仪(Varian),圆二色性光谱(ISAJOBIN-YVON)和UV-3010紫
外一可见分光光度计(HITACHI)分析固定化血红蛋白,使用RigakuDmax2000X一射线衍射仪来摄取X-
射线衍射图谱.通过批平衡的方法建立蛋白质分子在载体上的吸附等温线 以固定后平衡上清液中血红蛋
白的平衡浓度对蛋白质分子的装载量作图,得吸附等温线.
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