15-HETE对肺动脉内皮细胞一氧化氮合酶苏氨酸495位点（eNOS+Thr495）磷酸化的影响.pdfVIP

维普资讯 · 1896· 国痘堡生理盘查 !!』 ! !physlogy2006，22(10)：1896—1900 [文章编号] 1000—4718(2006)10—1896—05 15一HETE对肺动脉 内皮细胞一氧化氮合酶苏氨酸 495位点 (eNOSThr495)磷酸化的影响 叶 宏 ， 吕昌莲 ， 朱大岭 (哈尔滨医科大学， 黑龙江省生物医药工程重点实验室一省部共建国家重点实验培育基地， 哈尔滨医科大学附属第二医院药学部，黑龙江 哈尔滨 150086) [摘 要] 目的：探讨 15一羟化二十烷四烯酸 (15一HETE)对肺动脉内皮细胞 (pulmanoryarteryendothelial cells，PAECs)一氧化氮合酶 (endothelianitricoxidesynthase，eNOS)活性的影响。方法：通过测定大鼠离体肺动脉环 张力，比较去血管内皮、eNOS抑制剂 L—NAME对 15一HETE收缩肺动脉的影响；通过免疫沉淀和免疫印迹方法测 定牛PAECs经2×10～mol／L15一HETE作用后，eNOSThr495磷酸化情况；用免疫印迹方法测定 15一HETE对牛 PAECseNOS总蛋白表达的影响；用Greiss法检测 15一HETE及 15一脂氧酶 (15一LO)抑制剂CDC和NDGA对牛肺 动脉内皮细胞一氧化氮(NO)产量的影响。结果：(1)除去肺动脉内皮后，15一HETE收缩血管作用明显增强 (P 0．o1)。(2)抑制剂L—NAME10。mol／L可使 15一HETE收缩肺动脉的作用明显增强(P0．05)。(3)牛PAECs经 2×10～mol／L15一HETE作用后，eNOSThr495位点磷酸化水平增强 (P0．o1)。(4)10～mol／L15一HETE可抑 制亚硝酸盐 (NO2-／NO-2)的产生 (P0．05)，抑制 内源性 15一HETE可明显增加 NO2-／NO[的产量，和对照组相 比 10 mol／LCI)C组P0．05，10。mol／LNDGA组 P0．ol。结论：肺动脉内皮细胞 eNOS／NO通路参与抑制 15一 HETE收缩大鼠肺动脉，15一HETE抑制肺动脉内皮细胞eNOS活性，使 NO产量(NO-2／NO；)下降。 [关键词] 羟基花生四烯酸类 ；一氧化氮；血管收缩；肺动脉；内皮细胞 ；一氧化氮合酶 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Effect0f15(S)一hydr0xyeic0satetraenoicacid (15一HETE)oneNOS ThI-495ph0sph0rylati0n in pulmonaryarteryendothelialcells YE Hong ，LU Chang—lian ‘ZHU Da—ling ， (HarbinMedicalUniversity，DepartmentofPharmacy，TheSecondAffiliatedHospitalofHarbinMedcialUniversity，Bio— PharmaceutcialKe?LabofHei 一 ，Harbin150086，China．E—mail：dalingz@yahoo．com) [ABSTRACT] AIM：Toexaminetheeffectof15(S)一hydroxyeicosatetraenoicacid(15一HETE)oneNOSactivi· tyinpulmonaryarteryendothelialcells(PAECs)．METHODS：1．Ratpulmonaryartery (PA)ringsofintrapulmonaryar- teriesweresuspendedunderisometrictensioninoxygenatedKre