基质金属蛋白酶组织抑制剂TIMP2在结肠癌中的表达和意义.pdfVIP

2009年7月 中国民康医学 jul。2009 Medical ofChinese V01．21FHMNo．13 第2l卷上半月第13期 Journal People§Health 【临床研究】 基质金属蛋白酶组织抑制剂TIMP一2在结肠癌中 的表达及意义 李 明 (吉林市第二中心医院，吉林吉林132011) 【关键词】 基质金属蛋白酶组织抑制剂；结肠癌；侵袭转移 doi：10．3969／j．isan．1672—0369．2009．13．040 中图分类号：R735．35 文献标识码：B 文章编号： 12．0for 结肠癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，按照Duke6分 期，结肠癌的5年生存率与肿瘤的侵袭和转移能力密切相 异有统计学意义。 关。因此，寻找能反映结肠癌细胞侵袭和转移潜能的标记物 2结果 己成为研究的热点，明确这些标记物有利于肿瘤的早期诊 TIMP一2的表达在结肠癌不同性别、年龄、肿瘤部位、大 断、预测病情发展、指导临床治疗及改善患者预后。基质金 体类型、组织学类型、分化程度中差异均无统计学意义(P 属蛋白酶组织抑制剂TIMP一2是细胞外基质降解过程中的 重要酶类，与肿瘤的侵袭和转移有着密切的关系。 1材料与方法 分期越晚、发生淋巴结转移者表达降低(见表1)。 1．1 临床资料收集吉林市第二中心医院病理科2006年1 表1 TIMP一2在结肠癌中的表达与临床病理特征 月至2009年1月期间普通外科手术切除经病理诊断的结肠 之间的关系[(n)ok] 癌标本的存档蜡块，共35例。男性25例，女性lO例；年龄 35—85岁，平均55岁。根据病例临床及病理学资料分组：大 体类型：肿块型14例，浸润型lO例，溃疡型11例；组织学类 型：按照2000年WHO新的结肠肿瘤组织学分类标准及我国 的分类特点分类：①管状腺癌12例，黏液腺癌18例，印戒细 胞癌5例；②分化程度：高分化腺癌18例，中低分化腺癌17 例；③Dukes分期：A+B期15例，C+D期20例；④淋巴结转 移：无淋巴结转移者18例，有淋巴结转移者17例；另收集正 常结肠黏膜标本20例作为对照。 1．2实验方法采用SP免疫组织化学方法：(1)切片常规 脱蜡和水化后，PBS漂洗3次，每次3min；(2)于湿盒内用 3％过氧化氢溶液(A液)室温孵育10min；(3)滴加5％一 100k封闭用正常动物非免疫血清工作液(B液)；(4)滴加一 抗工作液，TIMP一2于37摄氏度孵育箱内孵育5个小时，PB 漂洗3次，每次3min；(5)滴加生物素标记二抗工作液(c 液)；(6)滴加辣根过氧化物酶标记的链酶卵白素工作液； (7)配制新鲜的DAB显色剂；(8)苏木素复染细胞核，染色时 间约为HE染色的半量(2rain)。 检验水准Ct=O．05。 1．3结果判定(1)阳性对照：用随试剂提供的己知阳性片 作为阳性对照。(2)阴性对照：实验中用PBS缓冲液代替一 3讨论 抗做为阴性对照。lIMP一2为细胞质内表达，镜下观察肿瘤 结肠癌的生长、侵袭和转移是一个多阶段、多水平、多因 细胞胞质出现黄色、棕黄色、棕褐色细小颗粒状，染色明显高 素的过程，其中的关键步骤是降解肿瘤周围的基质。大量的 于背景为阳性。高倍镜下随机取5个视野，每个视野计数 实验证明，瘤细胞侵袭转移能力与其诱导产生蛋白酶、降解 100个细胞，阳性细胞数10％定为阳性，阴性细胞数100k细胞外基质、基底膜的能力密切相关。基质金属蛋白酶抑制 定为阴性。①阳性细胞百分率：未见阳性细胞者为0分， 剂是基质金属蛋白酶主要的自然抑制物，确定的有TIMP一1 2