大肠杆菌链霉菌假单胞菌穿梭表达BAC载体的构建.pdfVIP

( ) Vo l. 33 No. 2 第 33卷第 2期 南京师大学报 自然科学版 2010年 6月 　　　　 ( ) 　　　　 JOURNAL OF NANJ IN G NORMAL UN IV ER SITY N atu ral Science Edition Jun , 20 10 大肠杆菌 链霉菌 假单胞菌穿梭表达 BAC载体的构建 黄慧颖 ,宋 　杰 , 尚广东 (南京市微生物工程技术研究中心 ,江苏省生物多样性与生物技术重点实验室 ,南京师范大学生命科学学院 ,江苏 南京 2 10046) [摘要 ] 　异源表达生理活性物质的生物合成基因簇是药物研发领域的一个重要的方向 ,它可通过异源表达来 研究基因功能 ,获得 目标化合物或对现有的化合物进行结构改造. 生物合成基因簇一般较大 ,常规的 DNA 载体 由于容量不足 、拷贝数较低或不能在不同的异源宿主间穿梭表达而难以对其进行操作. 本研究运用重组工程策 略和常规的克隆手段 ,将多个异源表达所必须的功能基因克隆至常用的构建 BAC文库的载体 p ECBAC1,获得了 一个可在大肠杆菌 链霉菌 假单胞菌 3个常见的异源表达宿主间进行穿梭表达的 BAC载体. [关键词 ] 　BAC载体 ,重组工程 ,穿梭表达 [中图分类号 ] Q819　[文献标识码 ] A 　[文章编号 ] 100 146 16 (20 10) 02 0 10405 Con struction of an E. co liStreptom ycesP seudom ona s Shuttle Expression BAC Vector Hu a n g Hu iy in g , So n g J ie , Sh a n g Gu a n gdo n g (N anj ing Engineering and Technology R esearch Center for M icrob iology, J iangsu Key L ab for B iodiversity and B iotechnology, School of L ife Science, N anj ing Norm al Un iversity, N anj ing 2 10046 , Ch ina) A b stract:H eterologou s exp re ssion of b io syn thetic gene clu ster is an important study area of drug research and develop m ent, and it can be u sed for gene function study, to ob tain target compound or its derivative s. A s b io synthetic gene clu s ter is u sually very large, norm al DNA vectors m ay have the p rob lem s of low content, hard to handle becau se of vector ’s low cop y num ber or not su it for shuttle exp re ssion in differen t hetero logou s strain s. In th is work, recom b ineering strate