豚鼠I型前庭毛细胞胆碱能受体通道特性.pdfVIP

维普资讯 生理学报ActaPhysiologicaSinica，June25，2008，60(3)：375—381 375 http：／／www．actaps．com ．cn 豚 鼠I型前庭毛细胞胆碱能受体通道特性 朱 云，孔维佳 ，夏 交，张宇，程华茂，郭长凯 华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科，武汉 430022 摘 要：本文 旨在探讨豚 鼠I型前庭毛细胞上有无胆碱能受体存在，并对其相应的离子通道特性进行研究。应用全细胞膜 片钳技术检测急性分离的豚 鼠I型前庭毛细胞对乙酰胆碱(acetylcholine，ACh)的反应。结果显示，7．5％(21／279)的I型前庭 毛细胞对 10—1000lamol／LACh敏感，引发明显的外向电流。该电流对ACh的反应呈浓度依赖性，半数激活浓度(EC。)为 (63．78~2．31)lamolFL，但该电流为非电压依赖性。在一50mV钳制 电压和正常细胞外液中，100lamolFLACh激活一持久缓 慢的外向电流，电流幅值为(170~15)pA，该电流幅值依赖于胞外钙离子浓度，可被胞外给予的钙依赖性钾通道拮抗剂TEA 阻断。I型前庭毛细胞的再次激活时间不小于 1min。长时间暴露在ACh的情况下，受体离子通道不会发生 自发性关闭。 以上结果提示，部分豚鼠I型前庭毛细胞上存在胆碱能受体，胞外给予ACh可激活一持久缓慢的外向电流，其胆碱能受体 通道对于ACh的作用呈浓度依赖性和外钙依赖性、非电压依赖性或失敏性。本研究结果对于阐明前庭传出神经的功能及其 作用机制，证实并揭示 I型前庭毛细胞上存在传出神经递质受体以及 日后临床指导眩晕疾病的康复治疗具有重要的意义。 关键词 ：乙酰胆碱 ；前庭；毛细胞 ；内耳 ；膜 片钳技术 中图分类号：Q437；R339．16 Propertiesofcholinergicreceptor-mediatedionchannelsontypeIvestibular haircellsofguineapigs ZHU Yun，K0NGWei—Jia，XIAJiao，ZHANG Yu，CHENGHua-Mao，GUO Chang—Kai DepartmentofOtorhinolaryngology，UnionHospital,TongjfMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology, Wuhan430D22．China Abstract：ToconfirmtheexistenceofcholinergicreceptorsontypeIvestibularhaircells(VHCsI)ofguineapigsandtostudythe propertiesofhtecholinergicreceptor-mediatedionchannelsonVHCsI，electrophysiologicalresponsesofisolatedVHCsItoexternal AChwereexaminedbymeansofwhole—cellpatch—clamprecordings．Theresultsshowedhtat7．5％(21／279)VHCS1wereofundtobe sensitivetoACh(10—1000lamol／L)．AChgeneratedanoutwradcurrentinasteady，slow，dose—dependentE【C50was(63．78~2．31) lamol／L】andvoltage—independentmanner．Instandardextracellularsolution，AChattheconcentrationof100lamol／Ltriggereda calcium—dependentcurrentof(170~15)pAatholdingpotentialof一50mV，andhtecurrentma plitudecouldbedepressedbyexrtacel— lularlyaddedcalcium—dependentpotassium channelantagonistTEA ．Thetimeintervalf0rtllenextcompleteactiva