4’甲醚黄芩素逆转人绒毛膜癌耐药细胞株多药耐药性的相关机制研究.pdfVIP

第 29卷第9期 南京医科大学学报 (自然科学版) 2009年 9月 ACTAUNIVERSITATISMEDICINALISNANJING(NaturalScience) ·12l5· 4’一甲醚一黄芩素逆转人绒毛膜癌耐药细胞株多药耐药性的相关机制研究 朱利群 ，徐 珊，李 卓，徐昌芬 (南京医科大学江苏省生殖医学重点实验室，江苏 南京 210029) [摘 要] 目的：探讨4’一甲醚一黄芩素(4’．MS)逆转人绒毛膜癌耐药细胞株JAR／VP16多药耐药性的可能机制。方法：采用流 式细胞术测定4’一M—S作用前后耐药细胞内罗丹明(Rh123)潴留量的变化 ，以检测4’一M，S对 糖蛋白(P-gp)功能的影响；用半 定量逆转录聚合酶链反应 (RT．PCR)检测多药耐药基因mdrlmRNA的表达 ，并进一步采用Westernblot及免疫组织化学法测定 mdrl基因产物P．gP的表达。结果：流式细胞术结果表明。20~xg／ml4’一MS可明显增加耐药细胞内潴留的Rh123浓度 ；RT—PCR 及Westernblot结果显示，4’M—s可抑制耐药细胞中mdrlmRNA和P—gP的表达 ；免疫组化实验显示，4’一M—S处理后，耐药细胞 中P—gP的表达下降，表现为细胞膜上阳性颗粒数量减少、着色变浅。结论 ：4’一M．s对人绒毛膜癌耐药细胞株多药耐药性的逆转， 与抑制mdrlmRNA及其产物P．gP的表达、增加细胞内化疗药物的浓度有关。 [关键词] 4’一甲醚一黄芩素 ；绒毛膜癌；多药耐药；耐药逆转；P-糖蛋白 [中图分类号] R730．5 [文献标识码] A [文章编号] 1007．4368(2009)09—1215．05 Reversemechanism of4’一methylether-scutellareinonmultidrugresisatanthumanchorio— carcinomaeellline ZHU Li—qun ，XU Shah，LIZhuo，XU Chang—feng (myLaboratoryofReproductiveMedicineofJiangsuPFOVince，NJMU，Nanjing210029，China) [Abstract] Objective：Toinvestigatethereversaleffectof4’一methylether—scutellarein (4’一M—S)onmuhidrugresistanceinhuman choriocarc~nomaJAR／VP16cellline．Methods：Quantitativeaccumulationandeffluxofrhodamine123(Rh123)，aP—glycoprotein(P— gp)snbstrate，weredeterminedusingaflowcytometricassay(FCM)formeasuringP—gPfunction．mdrlmRNAlevelsweredetectedby semi-quantitativereversetranscriptase—polymerasechainreaction (RT—PCR)．TheexpressionsofP—gPwereanalyzedbyWesternblot andimmunohistochemistry(IHC)method．Results：TheresultsofFCM suggestedthat20~g／ml4’一M—Scouldsignificantlyincreasethe intracellularaccumulationofRh123inJAR／VP16cells．RT—PCR andW esternblotresuhsrevealedthattheexpressionlevelsofmdrl mRNA and P-gP protein werelow in4’一M—Streated cells．TheIHC studyshowed thatmild immunostainingforP—gPwasseen in JAR／VP16cellswhentreatedwith4’．M S．Conclusion：Thereversaleffectof4’M—SinJAR／VP16cellmayberelatedtoregulating expressionofmdrl／P—gPandincreaseingintrac