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doi:10.16372/j.issn.1004—6364.2015.05.013
广西麻鸡感染A亚群
与J亚群禽白血病病毒的诊断
王培坤,秦丽莉,毕玉或,邹广珍,彭昊,韦平”
(广西大学,广西南宁530004)
摘要:对疑似患有禽白血病的广西麻鸡进行病理剖检、接种DF一1细胞进行病毒分离以及
对细胞培养上清进行p27抗原检测、细胞培养物进行PcR扩增,并对分离到病毒的即85基因进
行测序和分析比较。结果表明,从该病鸡同时分离到了A亚群禽白血病病毒(ALV—A)与J亚
群禽白血病病毒(ALv—J),分别命名为zsl4一A株、zsl4一J株。对ALV—Agp85、ALV—J卯85
基因的遗传变异分析结果显示,zsl4一A与6株国内外A亚群参考毒株之间的氨基酸同源性为
毒株之间的氨基酸同源性为83.4%~96.1%,其中与J亚群原型株HPRsl03同源性最高,为96.1%。
关键词:A亚群禽白血病病毒;J亚群禽白血病病毒;共感染;广西麻鸡;gp85
中图分类号:s855.3 文献标识码:A 文章编号:1004—6364(2015)05—56一03
leukosis l材料与方法
禽白血病病毒(Avian vims,ALV)能
引起禽的各种造血细胞肿瘤性增生,是鸡群中普 1.1材料
1.1.1 病料来源
遍存在着的一群反转录病毒01。其中A、B、c、D、
E、J六个亚群能够感染鸡,A、J较多在病鸡中分离 广西某鸡场30周龄灵山麻鸡,送检病鸡部分
到,少见B、C、D亚群,E亚群为内源性病毒,不具出现肝脏出血坏死,脾脏肿大,腹部有血管瘤等病
理变化。
有致病性特征。自Pavne等乜1发现ALV—J至今,禽
白血病在世界各国均有不同程度流行,给世界养 1.1.2 主要试剂
禽业造成了严重的经济损失口】。我国多个省份都 DF一1细胞本实验室提供;puC—T载体、DH5仪
DNA
有分离到ALV—J的报道n]。 购买于北京康为世纪公司;DL2000Marker、
2×t即PCRmix购于天根生化科技有限公司;
2014年2月广西某鸡场饲养的麻鸡出现疑
ALV
p27抗原检测试剂盒购买于IDExx公司;犊
似禽白血病症状,通过无菌采集肝脏病变组织
牛血清和DMEM购买于美国GIBCO公司。
后,分离病毒培养,提取前病毒DNAPCR扩增后
1.2方法
进行gP85基因的克隆测序,并与国内外不同的
1.2.1 病料处理和前病毒DNA提取
ALV毒株进行比较,对毒株的来源以及遗传变异
取病变组织加入5倍病变组织体积的灭菌生
性进行分析。
理盐水,研磨成浆,冻融3次后离心取上清,经
d
0.22¨m过滤后接种DF一1细胞进行病毒分离,9
收稿日期:2014—06—10
修回日期:2014—06—30
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