氧化应激对D半乳糖致衰老小鼠的影响.pdfVIP

苤挞蘧笠氢丝应邀盟坠：坐塾趋塑塞耋41鼠鳆墅蛔筮!!翅 ·1527· 氧化应激对D．半乳糖致衰老小鼠的影响 张林波黄帅 马广丽1 吴红珍姚华章宏2 (吉林农业大学生命科学学院，吉林长春130118) 【摘要] 目的探讨氧化应激与衰老的相互关系。方法应用腹腔注射D-半乳糖方法建立衰老模型，观察实验小鼠的外观特征，测定其运 动能力、免疫器官指数(胸腺指数、脾脏指数)、脾淋巴细胞增殖活性、血清和脑组织中的SOD及MDA含量，并进行统计学分析。结果与对照组相 0．01)。结论氧化应激参与了衰老的发生发展过程，降低了机体的免疫功能和抗氧化能力。 【关键词】氧化应激；D一半乳糖；衰老；模型 [中图分类号)R592(文献标识码】A [文章编号】100S-92a2(2010)11-152％03 近几十年来随着老年医学的发展，有关氧化应激与衰老的 运动能力)：取长2m、直径0．5cm的悬垂导线，将待测小鼠置 研究日益增多，目前对氧化应激在衰老发生发展中的作用已经 于距导线末端12cm处，记录小鼠3次从抓线至掉落时间。负 有了一定程度的了解。本文在国内外相关研究的基础上，通过 重力竭性游泳测试(运动性运动能力)：小鼠尾负重100 g／l￡g， cmx40cm×30 D．半乳糖腹腔注射建立衰老动物模型，通过生化、免疫手段系 放入50 em水箱中游泳，水温28℃±2。C，小鼠 统观察氧化应激与衰老发病机制问的关系，旨在为衰老机制及 连续3次沉入水中，每次超过10s不能浮出水面为力竭，记录 抗氧化药物开发奠定一定的实验基础。 小鼠游泳至力竭时间。 1．2．3．3免疫功能鉴定通过对免疫器官指数和脾淋巴细胞 1材料与方法 增殖活性的测定来衡鼙机体的免疫功能。建模后，与正常组相 1．1 实验动物与分组20只5～8周龄雄性昆明鼠，体重18～比，凡小鼠的免疫器官指数(胸腺和脾脏指数)和脾淋巴细胞增 25 w， g(购自吉林大学实验动物学部)，自由摄食、饮水饲养1 殖活性明显降低者即为成功模型。免疫器官指数(胸腺指数、 室温22℃一25。C。随机分为正常组和模型组，每组10只。 脾脏指数)的测定：实验结束后，将小鼠称重，各组小鼠经摘眼 1．2方法 球取血后，脱颈椎处死，75％酒精浸泡消毒，无菌开腹取脾脏、 1．2．1 主要试剂和仪器D．半乳糖(Sigma公司，临用前用 胸腺，用电子称称重，以脏器湿重(rag)／体重(g)表示小鼠脾脏 0．9％生理盐水配成浓度为3mg／na的溶液，0．22p,m滤膜过滤 指数和胸腺指数。即脾脏指数=脾脏重量(mg)／dx鼠体重 除菌)，四甲基偶氮唑盐(MIT)、ConA(北京鼎国公司)，超氧化 物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)生化检测试剂盒及考马斯亮蓝 殖活性的测定采用MTT法。 蛋白质定量试剂盒(南京建成生物工程研究所)，722型分光光 度计(北京普析通用仪器有限公司)，CO：培养箱(INCUBA— 活力的测定采用黄嘌呤氧化酶法，MDA的测定采用硫代巴比 TOR)，酶联免疫检测仪(美国Bio—Rad公司)。 1．2．2衰老模型的建立参照文献¨’2】，采用腹腔注射D-半 浆后再进行测定。具体步骤按照试剂盒说明书进行操作。 乳糖的方法建立衰老模型。模型组按每天150mg／kg剂量，腹 1．3 统计学分析用SPSSl3．0统计软件进行数据处理，实验 腔连续注射42d，造成衰老模型。对照组按同等剂量腹腔注射