扎龙湿地纤维素降解霉菌组成与活性研究.pdfVIP

第27卷第4期 齐 齐 哈 尔 大 学 学 报 Vo1．27．No．4 2011年 7月 JournalofQiqiharUniversity July，2011 扎龙湿地纤维素降解霉菌组成与活性研究 王志刚，徐伟慧，焦德志，肖静，莫继先 (齐齐哈尔大学 生命科学与农林学院，黑龙江 齐齐哈尔 161006) 摘要：采用取样富集的方法，运用形态学鉴定和滤纸降解技术 ，研究了扎龙湿地纤维索降解毒菌的组成和活性。 筛选出了7株具有纤维素降解能力的霉菌，它们分别属于接合菌门 (Zygomycota)毛霉 目(Mucorales)，接合菌 门(Zygomycota)球囊霉 目(Glomeromycetes)，子囊菌门(Ascomycota)的散囊菌 目(Eurotiales)，卵菌 ¨(Oomycota) 水霉 目(Saprolegniales)共4类，滤纸降解实验表明这7株霉菌纤维素降解活性均较高。揭示了扎龙湿地具有高 活性纤维素降解能力的霉菌组成，获得了大量的高效纤维素降解的生物资源。 关键词：扎龙湿地；纤维素；霉菌；降解活性 中图分类号：Q939．9 文献标识码 ：A 文章编号 ：1007—984X(2011)04—0050—03 纤维素是构成植物细胞壁的主要成分 ，是 自然界碳元素存储的中心 ，自然界通过光合作用每年产生 1000～1500X10t的纤维素 。纤维素在多数常用溶媒中极难溶解，难以直接利用，但是可通过微生物产生 的胞外酶降解生成纤维二糖或葡萄糖 ，目前报道较多的产纤维素酶微生物主要集中在霉菌，而且一些已经 进人工业生产阶段 ，例如木霉属、青霉属、曲霉属 。 扎龙湿地位于黑龙江省西部松嫩平原，是我国珍稀鸟类和湿地生态类型的国家级 自然保护区。其得天 独厚的自然条件，孕育了丰富的植被、吸引了各种珍贵鸟类和野生动物前来栖息。扎龙湿地植被分为草甸 草原植被、草甸植被、沼泽植被、水生植被4种类型，其中高等植物有 525种，隶属70科，以芦苇、羊草 为优势种 ，含有大量的纤维素类物质。同时湿地是地球碳循环中起着重要的作用，在湿地中纤维索类物 质的转化主要是靠微生物来完成的，但是 目前对该地的纤维素降解微生物资源报道还属鲜见。因此，以扎 龙湿地的纤维素降解霉菌为研究对象，揭示其组成并进行活性对研究湿地内部碳循环过程和高效纤维素降 解生物资源的获得均具有重要意义。 1 实验材料与方法 1．1 取样与富集 取扎龙湿地不同生态环境下的土壤样本2O个，混合均匀后，按着四分法取样，放在三角瓶中，添加玉 米秸秆在培养箱中培养7d进行放大富集。 1．2 实验材料 1．2．1 分离纯化 把富集完成的土样进行梯度稀释在1O浓度进行涂板 ，平板采用羟甲基纤维素钠复筛培养基，其组成 如下：CMC—Na20g，Na2HPO2．5g，KH2P041．5g，蛋白胨 2．5g，酵母膏 0．5g，蒸馏水1000mL，琼脂 20g，pH7．0-7．2。 1．2．2 菌种鉴定与保藏 霉菌的鉴定采用显微镜下观察孢子、包囊、菌丝等形态，与 《真菌鉴定手册》相结合，进行分类。菌 种在马铃薯培养基上培养并保存，其配方如下： 马铃薯 20g，蔗糖 2g，自来水100mL，琼脂2g，pH自然 (约6．0)。 收稿 日期：2010—04—07 基金项目：黑龙江省教育厅科学技术研究项 目(编号；黑龙江省教育厅科学技术研究项 目；齐齐哈尔大学青年科研启动支持 计划 (2010k—M10) 作者简介：王志刚 (1980一)，男，内蒙古赤峰人，讲师，在读博士，主要从事微生物生态方面的研究工作，wzg1980830@yahoo．(~Oliin。 第4期 扎龙湿地纤维索降解霉菌组成与活性研究 ·51． 1．2．3 纤维素降解活性的测定 以滤纸作为唯一碳源与能源，在摇瓶中培养48h，然后测定滤纸的残留量，从而评价降解菌的降解活 性。培养基的组成如下：KH2PO 2．0g，(NH4)zSO 1．4g，MgSO ·7Hz0O．3g，CaC1z0-3g，FeSO ·7H20 0