聚(4-乙烯基苯硼酸-季戊四醇三丙烯酸酯)亲和整体柱的制备与应用.pdfVIP

第40卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第8期 2012年8月 ChineseJournalof 1207～1212 AnalyticalChemistry 1300 DOI：10．3724／SP．J．1096．2012．1 聚(4一乙烯基苯硼酸一季戊四醇三丙烯酸酯)亲和 整体柱的制备与应用 王超然 王彦 高也 马丹丹 谷雪 阎超+ (上海交通大学药学院，上海200240) 摘 要 以4-乙烯基苯硼酸为单体，季戊四醇三丙烯酸酯为交联剂，偶氮二异丁腈为引发剂，乙二醇和二甘 醇为致孔剂，经原位聚合制备了聚(4-乙烯基苯硼酸一季戊四醇三丙烯酸酯)毛细管整体柱。以单体、交联剂、 致孔剂和引发剂的用量为4种因素，最大吸附量、柱效和保留时间为3个考察标准，利用实验设计软件(DOE) 优化了其合成条件，验证了正交实验最优结果，得到了整体柱合成的最佳配比为单体7．32 mg，致 mg，交联剂6 孑L剂100儿，引发剂1 mg。在最佳条件下合成整体柱，并进行表征，在微径液相色谱(IIHPLC)和加压毛细管 电色谱(pCEC)实验中考察了分离特性。结果表明，整体柱固定相表面的硼酸基团在碱性条件下能特异性吸 附邻苯二酚、腺苷等含有邻二羟基结构的化合物，具有亲和色谱的特性；同时由于交联剂的性质使其具有反相 分离机理，在含有20％有机相的条件下能够将极性不同的苯系物分开。 关键词 硼酸亲和色谱；整体柱；加压毛细管电色谱 1 引 言 整体柱(Monolithiccolumn)是由单体、交联剂、引发剂和致孑L剂等混合，通过原位制备而成的棒状 整体。整体柱因具有渗透性好、制备简单、无需塞子制作等优点而备受关注[1~3]。 硼酸亲和层析法成功分离了样品中的糖和核酸以来，越来越多的研究针对硼酸与顺二羟基的特异性反 应．将其应用于分离核苷、核酸、糖类以及酶等物质口]。还有研究将硼酸亲和凝胶色谱与质谱等技术联 用．从而实现对糖蛋白等的有效分析嘛71。 N，N-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂的两类整体柱。最近，他们又采用另一种硼亲和整体毛细管柱【1伽，将 氢键作用初步实现同柱上的第二维分离。Lowe等””也报道过同柱上先进行反相色谱分析，再进行硼酸 亲和的二维分离研究。硼酸亲和色谱的主要工作机理是硼酸基团与邻二羟基的可逆结合反应如下式： R9乳HH。O葺睾RC峨卅,o-L兰 … 在水溶液中，硼酸基团从原来的三键共面结构转变成带负电的四面体结构，这种结构可以与两个共 面的邻位羟基反应，形成稳定的五元环络合物。在酸性条件下，此酯化反应则会被还原，使反应逆向进 行，酯化所形成的两个共价键被打破，还原成硼酸基团和邻二羟基基团。另外，该作用能够在有机溶剂 21。 中发生，但是酯化率远小于在水溶液中反应【1 二羟基的化合物有特异性亲和作用，同时具有反相的双重作用，实现对腺苷和脱氧腺苷，以及苯系物等 样品的有效分离。 2011—11—16收稿；2012一02_13接受 器设备开发专项(Nos．2011YQl5007204，2011YQl5007207，2011YQl5007210)资助 +E—mail：chaoyan@sjtu．edu．cn 万方数据 分析化学 第40卷 2实验部分 2。1仪器与试剂 加压毛细管电色谱TriSepⅢ一210