第四章植物离体无性繁殖和脱毒技术.ppt

2、化学方法 如孔雀绿、硫脲嘧啶、蛋白质和核酸合成抑制剂、 抗生素等。 3、生物学方法 （1）茎尖分生组织培养 （2）微型嫁接 （3）愈伤组织诱导 （4）珠心胚培养 六、植物病毒的检测方法 1、指示植物检测法：利用病毒在已感染的指示植物上出现症状的特征作为鉴别病毒的依据，可采用汁液感染法或嫁接法进行鉴定。 2、血清学检测法：利用抗原和抗体的特异性结合进行病毒检测 3、电子显微镜检测法：可以直接观察病毒是否存在及病毒颗粒的大小、形态和结构 4、分子生物学检测法：通过检测病毒核酸来证实该病毒的存在 七、 脱毒植株的应用 脱毒植株可用于研究特定病毒对寄主植物的影响。 脱毒植株可恢复品种的特性，用于种质材料的保存和良种生产。 应用实例：脱毒马铃薯的制种是典型的脱毒苗应用实例。 马铃薯脱毒种薯的生产程序： ①脱毒苗的培育 a.植物材料的选取 b.材料的处理 c.茎尖剥离 d.培养 e.病毒检测 f.无病毒苗的扩繁 谢谢大家！ 第四章植物离体无性繁殖和脱毒技术  主要内容： 第一节 植物离体无性繁殖技术 第二节 植物脱病毒技术 学习的目标与要求： 掌握植物离体无性繁殖的概念和意义，影响离体无性繁殖的因素，了解离体无性繁殖过程中的技术问题；掌握植物脱病毒的方法和原理，了解植物脱病毒技术中的相关问题。 一、离体无性繁殖的概念和意义 1、离体无性繁殖（clonal propagation in vitro）：是指在离体培养条件下，将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行无菌培养，经过不断地切割和重复培养，使其增殖并再生形成完整植株，在短期内获得大量遗传性状均一的个体的方法，又称微繁殖(micropropagation)或快速繁殖（rapid clone propagation） 三、离体无性繁殖的技术步骤 1、供体植株的准备 2、无菌培养物的建立：包括外植体的采集、消 毒灭菌、接种及启动培养等 3、培养物的增殖 4、生根培养 5、试管苗的移栽及鉴定 2、意义： （1）取材少；生长周期短，繁殖率高；占用空间小， 人为控制培养条件，不受季节和外界 环境的影响， 便于实现规模化连续生产； （2）与脱毒技术相结合，可提供健康无病毒植株； （3）繁殖苗体积小，不携带病原菌，便于储运和种质材料 交换； （4）可以保持F1代的杂种优势以及植物的倍性。 二、离体无性繁殖的类型及其特点 （一）腋生枝型 特点：培养方法简单，苗壮，能保持遗传的稳定性，能长期继代繁殖，嵌合体的性状不易分离。 （二）不定芽型 特点：直接发生：繁殖系数大，遗传稳定性较好，但继代次数有限，且对于嵌合体植株的性状容易发生分离。 间接发生：繁殖系数大，但遗传稳定性较差，容易发生变异。对品种遗传稳定性高的作物一般不采用这种方法。 （三）体细胞胚型 特点：增殖率高，具有双极性，免去生根环节，但胚状体休眠的诱导和解除还难以把握，其成苗率仍不高，再生植株存在明显遗传变异及返幼特性。目前这一途径只局限于柑橘、油棕、咖啡等少数植物。 （四）原球茎型 ：外植体经诱导后，在其周围产生由胚性细胞组成，类似嫩茎的小圆锥状器官（解剖镜下呈桑果形状的圆球突起），称为原球茎，培养一段时间后，原球茎逐渐转绿，叶原基发育成幼叶，再诱导生根后就形成完整的再生植株。如兰花的茎尖培养就是通过这种方式繁殖的。 原球茎 分化小苗 1、从生长旺盛、无病虫害的健康母株上选材，不 要有伤口； 2、最好在晴天的中午或下午取材，不要再雨天、阴 天或露水未干时取材； 3、最好避开选用田间材料，可以将其种植在温室或 培养箱内； 4、选择易起始培养的组织作为外植体； 5、外植体采集下来以后，如果需要运送的距离较远， 则需要冷藏保湿运输。 四、外植体的选择与采集 （一）试管苗的特点 1、根：无根毛，根与茎的输导组织不相连，吸收及运输 水分效率低。 2、叶：角质层和蜡质层不发达，容易蒸腾失水；无表皮毛，保水和反光能力差；叶细胞结 构疏松，气孔突出，不能关闭，存在排水孔；叶片面积小，光合能力差。 五、试管苗 （二）促进试管苗生根的措施 1、降低矿质元素和蔗糖； 2、去掉细胞分裂素； 3、加入适量的NAA、IBA等生长素； 4、有时可加入一些酚类化合物（如间苯 三 酚等）。这些处理可促进生根和壮苗。 繁殖系