响应面法优化纤维堆囊菌So ce 90原生质体的制备条件.pdfVIP

第39卷第4期 工业微生物 Vd．39No．4 2009年8月 Industrial Aug．2009 Microbiology doi：10．3969]j．issn．1001—6678．2009．04．009 ce90 响应面法优化纤维堆囊菌So 原生质体的制备条件 孟凡欣， 王文涵， 王丽达， 许浩然， 郑 田， 郭伟良， 滕利荣。 (吉林大学生命科学学院，长春130012) ce 摘要 采用响应面法优化纤维堆囊茵So 90的原生质体制备条件。选择溶茵酶浓度，酶解 时间和酶解温度作为考察因子，在单因素试验的基础上，采用Box-Benhnken中心组合设计方法进 行三因素三水平试验设计。以原生质体生成率作为响应值，进行多元二次响应回归分析，得出纤维 ce 堆囊茵So 90原生质体制备的最佳条件为-溶茵酶浓度1．40 min，酶解 mg／mL，酶解时间为160 温度为30℃，响应模型预测的原生质体最高生成率为87．78％，在最优的条件下进行验证试验，得 到原生质体生成率为86．23％，与预测值间的相对误差为1．76％，表明采用响应面法优化纤维堆囊 茵Soce90原生质体的制备条件是可行的。 ce 关键词：响应面；纤维堆囊球菌So 90；原生质体制备 纤维堆囊菌(PolyangiumCellulosum)是溶纤 1材料与方法 维素群粘细菌，粘细菌是最高等的原核生物类群，是 革兰氏阴性单细胞细菌，能够在细胞间通过信号的 1．1菌种 ce 传递和感应，协同摄食、运动和发育形成子实体，具 纤维堆囊球菌So 90购买于DSMZ德国微生 有显著的社会学特征，粘细菌可产生丰富的次级代 物保存中心。 谢产物，尤其是溶纤维素群，其95％的菌株可产生 1．2培养基 生物活性物质，最具有代表性的有新型的抗癌药物 M26培养基：马铃薯淀粉0．8％，葡萄糖0．2％， ——埃博霉素。而纤维堆囊菌是一种革兰氏阴性 菌，其外表包围一层很厚的自身分泌的粘液，其原生 rng／L。 0．1％，CaCh·2I-／200．1％，V也0．5 质体的制备具有一定挑战性n。31，而原生质体的制备 1．3菌体的培养 是原生质体诱变菌种改良，原生质体融合等原生质 mL 在250mL的摇瓶，装入100M26液体培养 体相关技术的重要环节【删。响应面(RSM)法是采 基，按10％的接种量接入培养30h纤维堆囊菌s0 用多元二次回归方法作为函数估计的工具，研究考 ce90种子液，于30℃摇床振荡培养(150r／min) 察因子与响应值之间、考察