有氧运动epcs诱导大鼠心肌微血管新生能力的影响.pdfVIP

摘 要 目的：研究有氧运动对EPCs诱导大鼠心肌微血管新生能力的影 响。 方法：健康两月龄雄性SD大鼠20只，按体重随机分为两组，即 空白对照组和有氧运动组。采用递增负荷跑台训练建立有氧运动模型， 每周训练6天，为期8周。方案结束后12h提取大鼠外周血和骨髓， 运用密度梯度离心法分离得到单个核细胞，以EGM．2培养诱导其分 化获取内皮祖细胞，通过双荧光染色法观察细胞对乙酰化低密度脂蛋 白的摄取和与荆豆凝集素1的结合，并结合形态学特征鉴定内皮祖细 胞，倒置显微镜下计数贴壁细胞数量以反映细胞增殖情况和黏附能力； 制备心室肌标本，采用免疫组织化学方法检测CD34阳性细胞以定位 心肌组织微血管，免疫组织化学方法检测微血管上ACl33阳性蛋白表 达，显微图像分析系统对CD34和ACl33阳性表达定量分析，流式细 胞术检测外周血单个核细胞CD34+、CD34+／Flk-1+细胞比例。 结果：(1)CD34较好地标记了心肌组织微血管，对照组大鼠心 肌组织微血管内皮上有微弱的ACl33蛋白表达，有氧运动组大鼠心肌 O．01)； (2)外周血单个核细胞中CD34+细胞比例有氧运动组高于对照 学意义(P0．05)； (3)细胞双荧光染色呈双阳性，表明所培养的贴壁细胞为内皮 祖细胞； (4)无论是第48小时还是第7天，有氧运动组外周血和骨髓来 源的内皮祖细胞数量较对照组都更多(PO．05)； (5)随着培养时间延长(7天内)，对照组的外周血和骨髓来源 贴壁细胞数量都发生了增殖(PO．01)，同样增殖的还有有氧运动组 的外周血源贴壁细胞(PO．05)和有氧运动组的骨髓来源贴壁细胞(P O．01)： (6)第lO天的黏附能力检测结果显示，有氧运动组较对照组贴 壁细胞数量明显增加(PO．01)。 结论：(1)持续8周的递增负荷有氧运动能促进SD大鼠心肌微 血管的新生，这种血管新生有内皮祖细胞的参与； (2)持续8周的递增负荷有氧运动使大鼠外周血中干细胞增多， 同时促进了内皮祖细胞的增殖与黏附； (3)持续8周的递增负荷有氧运动使大鼠骨髓中内皮祖细胞的 动员、增殖与黏附能力增强； (4)有氧运动促进大鼠心肌微血管新生的机制可能是有氧运动 促进了大鼠骨髓中内皮祖细胞的动员和增殖，从而释放入血，使循环 中内皮祖细胞数量增多、粘附能力增强，并归巢于大鼠心肌微血管壁 后，参与诱导微血管的新生。 · 关键词：有氧运动；内皮祖细胞：心肌组织；血管新生；骨髓； 细胞培养 Ⅱ ABSTRACT Endothelialcellsderivedfrombonemarrowand Objective progenitor bloodofmale viaaerobic culturedin peripheral rats，which exercise，were of and vitro．Then，we thestatus adherent investigated proliferative ofendothelial cellstounderstandthe andthe capacity progenitor change mechanismon incardiactissueofrats． angiogenesis MethodThe ectswere20male ratsin 2 subj