NF-κB信号通路在大鼠肝再生中调节肝细胞增殖的机理研究.pdfVIP

第41卷第6期 河南师范大学学报(自然科学版) V01．41No．6 HenanNormal ScienceEdition) Nov．2013 Journal University(Natural 2013年11月 of 文章编号：1000—2367(2013)06—0167—05 NF—KB信号通路在大鼠肝再生中 调节肝细胞增殖的机理研究 王彬彬h2，常翠芳2，鲁艳平1’2，贾艺峰2，徐存拴1’2 (1．河南师范大学生命科学学院，河南新乡453007；2．河南省科技部共建细胞 分化调控国家重点实验室培育基地，河南新乡453007) Genome230 摘 要：为了解大鼠肝再生中肝细胞NF-JcB信号通路对肝细胞增殖的调节作用，用Rat 2．0芯片 检测大鼠肝再生中NF—tcB信号通路相关基因表达变化发现，芯片含138个NF-JcB信号通路基因，其中46个基因与 Analysis9．0(IPA)软件解析上述基因表达变化预示的该信号通路调节肝细 大鼠肝再生相关．用IngenuityPathway 胞增殖作用发现，该通路的白细胞介素1(IL一1)途径在大鼠肝再生起始阶段促进肝细胞增殖，生长因子(GF)途径在 进展阶段促进肝细胞增殖，肿瘤坏死因子一a(TNF-a)途径在起始阶段促进肝细胞增殖，终止阶段抑制肝细胞增殖． 关键词：大鼠肝再生；肝细胞增殖；NF一*B信号通路；通路创建与分析 中图分类号：Q257 文献标志码：A 肝脏是动物的重要器官，肝细胞约占肝脏细胞总数的65％和总肝量的70％～80％，承担着解毒、代谢、 胆汁合成、生物转化等功能[1_2]．正常情况下，成年肝脏的绝大多数肝细胞处于静止状态，但当肝损伤或部分 肝切除(partial 为肝再生，分为起始(PH后2～6h)，进展(PH后12～72h)和终止(PH后120～168 h)3个阶段H’5]，受包 括NF一．cB信号通路在内的许多信号通路调控[6]．为了解大鼠肝再生中肝细胞的NF—KB信号通路对肝细胞增 殖的调节作用及其机理，本文用percoll密度梯度离心分离大鼠肝细胞，用大鼠基因组基因表达谱芯片Rat Genome230 2．0检测NF—KB信号通路基因在大鼠肝再生中表达变化，用通路创建与分析(IPA)软件分析这 些变化预示的该信号通路调节肝细胞增殖的机理． 1材料与方法 1．1 大鼠肝再生模型的制备与肝细胞分离、鉴定 按本研究组先前报道的方法制备大鼠2／3肝切除模型(PH组)和手术对照，又称假手术模型(SO组)， 分离大鼠肝细胞[78]，用肝细胞标志蛋白ALB和G6P的免疫组化鉴定肝细胞．实验用肝细胞纯度和活性均 ≥95％． 1．2 RatGenome230 2．0芯片检测及数据整理 按本研究组先前报道的方法分离、纯化肝细胞的RNA凹1．对每张芯片的表达信号值做均一化处理，用实 时，视该基因发生有意义表达变化．同时，F检验PH组与SO组的基因表达变化差异性m]，将差异显著 收稿日期：2013—03—15；接收日期：2013—05—10 基金项目：国家973项目前期研究专项基金资助项目(2010CB534905) 作者简介：王彬彬(1986一)，女，河南省义马市人，河南师范大学硕士毕业生，主要从事系统生物学研究． 通讯作者：徐存拴(1958一)，男，河南省林卅I市人，教授，博士生导师，主要从事再生生物学与细胞分化调控机理研究， E-mail：XUCS@x263．net． 万方数据 168 河南师范大学学报(自然科学gt) 肝再生相关基