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最新高中生物精品教学课件:.分解纤维素的微生物的分离(人教版选修).ppt
酶 筛选 操作 结果 延伸 分解纤维素的微生物的分离 ①组成 ②作用 ③实验验证纤维素酶的作用 一、纤维素和纤维素酶 1、纤维素 ①纤维素含量 ②基本单位、简式 ④思考:纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,植物每年产生的纤维素超过70亿吨,但却不会在地球上大量的积累,为什么? ③应用:纺织、造纸 食物中的膳食纤维可刺激胃肠的蠕动和分泌消化液 2、纤维素酶 二、纤维素分解菌的筛选 1、筛选方法 2、筛选原理 刚果红染色法 3、筛选过程 练一练: 1、下列关于纤维素酶的说法,错误的是 A、纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种 B、纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖 C、纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁 D、葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖 2、利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌,下列说法错误的是 A、刚果红能与纤维素形成红色复合物 B、刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C、刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D、若培养基上产生了透明圈,则说明已筛选出了纤维素分解菌 资料一:土壤取样 1、取样的环境是怎样的,作出这种选择的理由是什么? 2、实例:树林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝败叶等。 3、讨论:如果找不到合适的环境,可以将滤纸埋在土壤中,将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋在土壤中多深? 三、实验设计 资料二:选择培养 1、选择培养的目的 2、制备选择培养基 a、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基?为什么? b、这个培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,是如何进行选择的? c、你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用? 有选择作用,能够产生纤维素酶的微生物才能分解纤维素作为碳源,并大量繁殖 用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照 为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物? 3、操作方法 液体培养基 方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应 方法二:在倒平板时就加入刚果红 资料三:刚果红染色法 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 三、实验设计 思考:这两种方法各有哪些优点与不足 方法一 缺点是操作烦琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发 生混杂;优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 方法二 优点是操作简便,不存在菌落混杂问题 缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质,可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应;缺点二有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红,形成明显的透明圈,与纤维素分解菌不易区分 土壤取样 取样的环境是怎样的,作出这种选择的理由是什么? 选择纤维素丰富的环境,如树林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝败叶等等。 生物与环境的互相依存关系,在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境 选择培养 1、选择培养的目的: 增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物 2、制备选择培养基 参照课本29页旁栏中的比例配置,回答下列问题 a、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基?为什么? b、这个培养基对微生物是否具有选择作用?如果具 有,是如何进行选择的? c、你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用 是液体培养基,原因是配方中无凝固剂 有选择作用,本配方中的碳源是纤维素,所以能分解纤维素的 微生物可以大量繁殖 用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照 3、操作方法: 将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下震荡培养1~2天,直至培养液变浑浊。也可重复选择培养 思考:为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物? 在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用 梯度稀释 按照课题1 的稀释操作方法,将选择培 养后的培养基进行等比稀释,稀释最大倍数 到106 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 1、制备培养基:参照旁栏中的比例 2、涂布平板:将稀释度为104~106的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上,30℃倒置培养 挑选产生透明圈的菌落 参照课本刚果红染色法,挑选产生透明圈的菌落,一般即为分解纤维素的菌落 刚果红染色法 方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应 方法二:在倒平板时就加入刚果红 思考:这两种方法各有哪些优点与不足 方法一 缺点是操作烦琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发 生混杂;优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 方法二 优点是操作简便,不存在菌落混杂问题 缺点一是
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